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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 目的基因在质粒上表达，但是整合到基因组上不表达
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zyly605

银虫 (小有名气)

[求助] 目的基因在质粒上表达，但是整合到基因组上不表达 已有1人参与

目的基因通过构建质粒的形式转入谷棒，目的基因表达了，但是将目的基因整合到基因组上，目的基因就不表达了，可能原因是什么？
如：将木糖利用基因通过质粒的形式表达菌株可以利用木糖，但是整合到基因组上，菌株不能利用木糖，可能原因是什么？
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1楼 2020-01-03 20:47:54
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zyly605 at 2020-01-04 19:35:54
插入到基因组上的目的基因前面添加了启动子，整合结果测序正确；但是你说的第二种情况不确定，如何验证呢...

这跟你整合到基因组上的方法有关，如果类似同源重组或者CRISPR方法的话，那就是单拷贝，就是你的基因只会整合到基因组上一个确定的位置。
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6楼2020-01-04 20:55:34
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得分两种：一是基因确实不表达，整合到基因组上是带有启动子还是利用基因组上的启动子？整合过程中是否出现错误？二是基因表达了，只是比较低。插入基因组是单拷贝还是多拷贝，一般质粒的拷贝数是很高的，两者之间有多大差距。
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zyly605
2楼2020-01-04 08:51:40
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
表达量降低了，不是不表达

发自小木虫Android客户端
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3楼2020-01-04 17:14:14
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zyly605

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 雨独步 at 2020-01-04 08:51:40
我觉得分两种：一是基因确实不表达，整合到基因组上是带有启动子还是利用基因组上的启动子？整合过程中是否出现错误？二是基因表达了，只是比较低。插入基因组是单拷贝还是多拷贝，一般质粒的拷贝数是很高的，两者之 ...

插入到基因组上的目的基因前面添加了启动子，整合结果测序正确；但是你说的第二种情况不确定，如何验证呢
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4楼2020-01-04 19:35:54
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