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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 连续性PAGE和不连续PAGE区别
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your2007

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 连续性PAGE和不连续PAGE区别

如题，连续性PAGE和不连续PAGE以及变性和非变性PAGE蛋白胶到底是怎么回事啊，谢谢
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爱人者被爱，敬人者人敬
1楼 2009-06-13 10:41:27
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)
★
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记得 连续性指凝胶缓冲液与电泳缓冲液的成分一致，非连续指二者成分不同。可能是这样的。
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2楼2009-06-13 10:48:52
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生物之渊

铜虫 (小有名气)
SDS加不加是变性和非变性的区别；有没有浓缩胶是连续性PAGE和不连续PAGE的区别
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3楼2009-06-13 12:45:32
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hu6704526

银虫 (小有名气)
★
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首先来谈连续和不连续，二者的区别是浓缩胶的有无，主要作用是浓缩样品成一条线，如果你的加样量很少的话，比如小于5微升的话，浓缩胶加不加差别不大，因为浓缩胶和分离胶的浓度时不一样的，所以是不连续的，连续的就是指只有分离胶，因为浓度都是一样的，所以是连续的。接下来说变形和非变性，除了SDS的有无，还有的区别就是缓冲液的酸度值不一样，这个包括配胶的缓冲液和电极缓冲液，变形的是8.8，非变性的是7.0。它们在对样品的分离上也不同，变性的主要分离变性的蛋白质，非变性的主要分离不能变性的蛋白质，比如需要保留其蛋白活性的蛋白质。
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4楼2009-06-13 16:58:26
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your2007

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by hu6704526 at 2009-6-13 16:58:
首先来谈连续和不连续，二者的区别是浓缩胶的有无，主要作用是浓缩样品成一条线，如果你的加样量很少的话，比如小于5微升的话，浓缩胶加不加差别不大，因为浓缩胶和分离胶的浓度时不一样的，所以是不连续的，连续 ...

真的很感谢你说的这么详细，再问下就是说我想做非变性PAGE，然后割胶测定酶活力，我需要做多大的体系呢，做胶时不加梳子直接上样，估计1ml左右，做大胶，还是做小体系的小胶呢，恳请指点，谢谢！
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爱人者被爱，敬人者人敬
5楼2009-06-13 17:16:49
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hu6704526

银虫 (小有名气)
★
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我个人认为你应该去做一个制备的电泳，比如管状电泳，这个上样量大一些。你这个没有必要用大胶，因为你的目的是制备，不是分析。所以不要求很大的分辨率，大胶浪费时间和心情。
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6楼2009-06-15 10:56:41
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