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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】简单的标准曲线出问题了
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gerc

[交流] 【求助】简单的标准曲线出问题了

分光光度法在660nm处测量Th溶液的吸光度.
配制系列浓度标准溶液很过程很简单,就直接在10ml比色管中加入0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml 1ug/ml的Th标准溶液，加入1ml显色剂，用7mol/L盐酸定容.

测量结果线性十分不好，吸光度偏低，加标0.5ml的吸光度往往只有0.007左右，加标5.0ml的吸光度在0.160左右，有时加标0.5ml、1.0ml处吸光度还出现负值。
说明情况：
1。比色皿为1cm
2。已用其它分光光度计平行测试比较过，测量结果类似，故排除仪器自身问题
3。平行实验已做过不下八次，测量结果类似，排除人为操作失误
4。已做光谱扫描，吸收峰确实在660nm处

做了那么多次都不成功，真是郁闷呀，希望各位指点指点
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1楼 2009-06-10 19:25:46
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蛋白质组

铜虫 (正式写手)
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楼主做实验很认真。
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2楼2009-06-10 19:59:53
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naren4545

木虫 (正式写手)
★
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做曲线，一般要求吸收在0.3-0.7之间的，参见紫外-可见分光光度法！超过此范围做定性都不是很准确的！
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3楼2009-06-10 21:04:17
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happyhao4

铜虫 (小有名气)
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楼主使用的是不是同一个比色皿？
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4楼2009-06-10 22:13:42
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zheng_533

银虫 (正式写手)
★ ★
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二楼的意见值得注意，楼主用的是同一个厂家的比色皿吗？如果不一样，那透光能力就不同了。
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5楼2009-06-10 22:20:38
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zhyvonne262525

木虫 (著名写手)
★
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二楼的意见值得注意，楼主用的是同一个厂家的比色皿吗？如果不一样，那透光能力就不同了

另显色时间一样吗?
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6楼2009-06-10 22:25:07
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筱梦

铜虫 (小有名气)
★ ★
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是不是忘记调零了。我一个同学做的时候 都没有调零 我觉得每次侧样都要调零吧 不知道对不对。请多多指教。
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7楼2009-06-10 22:31:55
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gerc

谢谢各位的建议!
我使用的是同一个石英比色皿, 仪器为UVmini-1240,为单个比色槽.
使用试剂空白(只加同样量显色剂,7M盐酸定容)作参比,已校零!
问题还是如上所说!
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8楼2009-06-11 00:03:09
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renzhihai

铜虫 (初入文坛)
★
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相同的问题在其他分光光度计上也发生了吗？
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9楼2009-06-11 05:20:33
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weipingwu

金虫 (正式写手)
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你的试验过程我觉得有问题：（1） 如果吸光度太低，就要尝试增加标液的浓度，使吸光度值A在0.1~1之间即可。（虽然课本上说吸光度控制在0.4~0.7误差好最小，但是做标准曲线，不可能保证所有数据都落在那个区域）。（2） 配制溶液最好选用容量瓶配制，比色管精度差些，溶液浓度配制准确，才可能保证线性良好。
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不经历风雨，怎能见彩虹？
10楼2009-06-11 09:00:34
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