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gerc

[交流] 【求助】简单的标准曲线出问题了

分光光度法在660nm处测量Th溶液的吸光度.
配制系列浓度标准溶液很过程很简单,就直接在10ml比色管中加入0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml 1ug/ml的Th标准溶液,加入1ml显色剂,用7mol/L盐酸定容.

测量结果线性十分不好,吸光度偏低,加标0.5ml的吸光度往往只有0.007左右,加标5.0ml的吸光度在0.160左右,有时加标0.5ml、1.0ml处吸光度还出现负值。
说明情况:
1。比色皿为1cm
2。已用其它分光光度计平行测试比较过,测量结果类似,故排除仪器自身问题
3。平行实验已做过不下八次,测量结果类似,排除人为操作失误
4。已做光谱扫描,吸收峰确实在660nm处

做了那么多次都不成功,真是郁闷呀,希望各位指点指点
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weipingwu

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
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opq691(金币+2):谢谢回帖交流,欢迎常来分析版
你的试验过程我觉得有问题:(1) 如果吸光度太低,就要尝试增加标液的浓度,使吸光度值A在0.1~1之间即可。(虽然课本上说吸光度控制在0.4~0.7误差好最小,但是做标准曲线,不可能保证所有数据都落在那个区域)。(2) 配制溶液最好选用容量瓶配制,比色管精度差些,溶液浓度配制准确,才可能保证线性良好。
不经历风雨,怎能见彩虹?
10楼2009-06-11 09:00:34
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蛋白质组

铜虫 (正式写手)

★ ★
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opq691(金币+1):谢谢回帖交流,欢迎常来分析版
楼主做实验很认真。
帮忙顶帖
2楼2009-06-10 19:59:53
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naren4545

木虫 (正式写手)


opq691(金币+1):谢谢回帖交流,欢迎常来分析版
做曲线,一般要求吸收在0.3-0.7之间的,参见紫外-可见分光光度法!超过此范围做定性都不是很准确的!
3楼2009-06-10 21:04:17
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happyhao4

铜虫 (小有名气)

★ ★
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opq691(金币+1):谢谢回帖交流,欢迎常来分析版
楼主使用的是不是同一个比色皿?
4楼2009-06-10 22:13:42
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