| 查看: 2446 | 回复: 6 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
crystal8595银虫 (初入文坛)
|
[交流]
求助：鲑鱼精DNA
|
||
偶是新手 ~~~前一段时间做电转化毕赤酵母，一直转不进去。 现在想试试化学转化法，其中的鲑鱼精DNA，比较难买 请问做过这方面的师兄师姐们都是从哪里买的呢？使用的时候有什么注意事项吗？ 小女先在这里谢过了！！ ps：现在实验室只有我一个人做，所以买少量的就ok了~ [ Last edited by amisking on 2010-3-22 at 17:31 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有142人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
yuweibest
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2455.2
- 散金: 12
- 红花: 1
- 帖子: 988
- 在线: 127.5小时
- 虫号: 704970
- 注册: 2009-02-20
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
2楼2009-06-10 20:14:26
yuweibest
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2455.2
- 散金: 12
- 红花: 1
- 帖子: 988
- 在线: 127.5小时
- 虫号: 704970
- 注册: 2009-02-20
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
3楼2009-06-10 20:23:13
iaminxanadu
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1473.3
- 散金: 1300
- 红花: 14
- 帖子: 631
- 在线: 429.6小时
- 虫号: 531438
- 注册: 2008-03-23
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
4楼2009-06-10 23:51:56
dianaofyezi
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1660.1
- 散金: 26
- 帖子: 721
- 在线: 67.1小时
- 虫号: 371239
- 注册: 2007-05-14
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
5楼2009-06-11 10:45:12
6楼2009-06-12 06:33:02
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3): 2010-03-22 17:32
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3): 2010-03-22 17:32
|
我最经也想用氯化锂的方法做转化，但是不知道鲑鱼精DNA要怎么处理，看到网页上有一种处理方法，也不是很明白，想请教你一下。 鲑鱼精DNA 说明：生化研究。 CAS＃：9007-49-2 外观：白色线状 特性：Linkage：Formerly listed as Type III 溶解性：溶于水，参考浓度2mg/ml 储存条件：2-8℃ From Sigma D1626 Salmon DNA 的配制： 组份浓度10 mg/ml Salmon DNA ;配制量约100 ml 配制方法: 1. 称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中，加入约200 ml的TE Buffer。 2. 用磁力搅拌器室温搅拌2～4小时，溶解后加入4 ml的5 M NaCl， 使其终浓度为0.1 M。 3. 用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次。4. 回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20 次，以切断DNA。 5. 加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。 6. 离心回收DNA后，溶解于100 ml的去离子水中，测定溶液的OD260值。 7. 计算溶液的DNA浓度后，稀释DNA溶液至10 mg/ml。 8. 煮沸10分钟后，分装成小份(1 ml/份)。-20℃保存。 9. 使用前在沸水浴中加热5分钟后，迅速冰浴冷却。 第3步中苯酚和氯仿的用量是多少啊，我查了很久，都没找到。 还有第五步中的乙醇用的是无水乙醇吗？ 请做过这个实验的大侠指点一下。 |
7楼2010-03-22 17:19:48
