24小时热门版块排行榜    

查看: 853  |  回复: 5
当前主题已经存档。

fyn512045

新虫 (初入文坛)

[交流] 谁出现过菌液检测条带很亮,但测序的结果说是空质粒,但还有序列测出,但不是

麻烦各位帮个忙,谁出现过菌液检测条带很亮,但测序的结果说是空质粒,但还有序列测出,但不是目的条带,谢谢!

[ Last edited by amisking on 2009-6-10 at 18:09 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有时候,单菌落被有带空载体的菌落污染,需要重挑单菌落
2楼2009-06-10 14:17:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看你的引物在哪个位置,空载体有时候也可以检测出条带,但是条带的位置和理论上的位置不符,只能说位点上插入的不是你的目的条带,至于插入什么条带,测序之后你可以分析一下,但是,我猜想测序的引物是一端的,这样出序列是正常的,可能是你载体上的序列;所以,t载链接之后,除了要pcr,还要酶切检测(或者用目的基因上的引物等等),之后,没有问题再去测序
会当凌绝顶,一览众山小
3楼2009-06-10 14:32:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fyn512045

新虫 (初入文坛)

谢谢各位了!

我的目的片段是1500bp,做出来的大概接近1400bp,克隆后,挑斑时,斑长的既大有圆的,分离也很好,就是一点条带一直不怎么单一,菌液检测时杂带又很少了啊,没有道理啊,空质粒怎么会出现亮的条带啊。
4楼2009-06-10 17:42:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
既然是空质粒 怎么会有序列测出呢?
1400BP的产物完全不是你要的序列吗(没有相同的序列)
这个很可能是非特异性的扩增引起的,PCR引物可能设计不好
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
5楼2009-06-10 19:22:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fyn512045

新虫 (初入文坛)

就是郁闷啊,条带很亮,测序说是空质粒,但他们把序列发过来了,看了基本没有的,我做的就是非特异性扩增啊。
6楼2009-06-11 14:42:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fyn512045 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
信息提示
请填处理意见