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BSA羧基偶联氨基DNA 已有2人参与
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虫子们,有没有做过BSA羧基偶联氨基DNA的?最近做了两个月,还是没有一个很好的结果,说下我的实验条件。参照文献,尝试了两种方法: 1. 向20uLBSA中加入800uLMES(PH=6,EDC 2.8mg,NHS 1.6mg)溶液,振荡15min后,加入800uL 10mM PBS(PH=7.4), 之后进入20uL 10uM氨基DNA,振荡6h后放置到4度冰箱过夜。 2、向20uLBSA中加入800uLPBS(PH=7,EDC 2.8mg,NHS 1.6mg)溶液,振荡15min后,加入20uL 10uM氨基DNA,振荡6h后放置到4度冰箱过夜。 第二天超滤掉游离DNA,对比滤液与原样品紫外吸收,发现这两种方法在260nm处几乎没有下降。说明DNA未偶联成功,请问虫子们问题出在哪里?非常感谢大家的指教。 |
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