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小美666666

新虫 (小有名气)

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专业: 环境分析化学

[交流] BSA羧基偶联氨基DNA 已有2人参与

虫子们，有没有做过BSA羧基偶联氨基DNA的？最近做了两个月，还是没有一个很好的结果，说下我的实验条件。参照文献，尝试了两种方法：
1. 向20uLBSA中加入800uLMES（PH=6，EDC 2.8mg，NHS 1.6mg）溶液，振荡15min后，加入800uL 10mM PBS(PH=7.4), 之后进入20uL 10uM氨基DNA，振荡6h后放置到4度冰箱过夜。
2、向20uLBSA中加入800uLPBS（PH=7，EDC 2.8mg，NHS 1.6mg）溶液，振荡15min后，加入20uL 10uM氨基DNA，振荡6h后放置到4度冰箱过夜。
第二天超滤掉游离DNA，对比滤液与原样品紫外吸收，发现这两种方法在260nm处几乎没有下降。说明DNA未偶联成功，请问虫子们问题出在哪里？非常感谢大家的指教。

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