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20022002db

[交流] 细胞内有荧光,WB却检测不出表达

我用的pEGFP-C1载体,上面连有我的目的基因,转染的293T细胞,用荧光显微镜能观测到荧光,但是WB检测却没有任何条带,很奇怪,转染的空载体有条带,而且转染的另一个目的基因也有条带,很是郁闷,大家帮我解释一下吧

[ Last edited by amisking on 2009-6-10 at 11:57 ]
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20022002db

谢谢,但是可以具体解释一下吗?
3楼2009-06-10 11:18:02
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
考虑下做WB的抗体影响。
52187644
2楼2009-06-10 11:01:20
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mourning

木虫 (正式写手)

试验操作问题不可忽略,目的基因产物用的什么一抗呢?这个比较容易有问题
4楼2009-06-11 18:55:12
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cpu2004

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
抗体的问题吧,能不能有阳性对照物看看抗体是不是正常吧。膜的影响也挺大的。。。我的样本就是NC膜做不成只能用PVDF,实验室另一个哥们却是PVDF做不出只能用NC。。。
5楼2009-06-11 19:32:56
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