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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞内有荧光，WB却检测不出表达
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20022002db

[交流] 细胞内有荧光，WB却检测不出表达

我用的pEGFP-C1载体，上面连有我的目的基因，转染的293T细胞，用荧光显微镜能观测到荧光，但是WB检测却没有任何条带，很奇怪，转染的空载体有条带，而且转染的另一个目的基因也有条带，很是郁闷，大家帮我解释一下吧

[ Last edited by amisking on 2009-6-10 at 11:57 ]
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1楼 2009-06-10 09:23:43
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
考虑下做WB的抗体影响。
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52187644
2楼2009-06-10 11:01:20
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20022002db

谢谢，但是可以具体解释一下吗？
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3楼2009-06-10 11:18:02
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mourning

木虫 (正式写手)
试验操作问题不可忽略，目的基因产物用的什么一抗呢？这个比较容易有问题
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4楼2009-06-11 18:55:12
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cpu2004

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
抗体的问题吧，能不能有阳性对照物看看抗体是不是正常吧。膜的影响也挺大的。。。我的样本就是NC膜做不成只能用PVDF，实验室另一个哥们却是PVDF做不出只能用NC。。。
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5楼2009-06-11 19:32:56
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