| 查看: 986 | 回复: 15 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 wh7690703 的 2 个金币 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
wh7690703木虫 (正式写手)
|
[交流]
随机突变，目的片段如何与pET-28a连接的多些
|
||
|
如题，本人想做随机突变，先通过易错PCR，扩增得到随机突变的目的片段，然后双酶切（NdeI和HindIII），之后与用同样的内切酶酶切的pET-28a相连，试了好多次，都无一成功。推测原因可能是目的片段很难双酶切成功。 所以借此宝地，向各位高手请教，您们是如何解决这个难题的！望大虾们不吝赐教。 |
回复此楼» 猜你喜欢
化学工程085602 305分求调剂
已经有10人回复
-
289求调剂
已经有15人回复
-
291 求调剂
已经有7人回复
-
274求调剂
已经有14人回复
-
北京林业大学硕导招生广告
已经有3人回复
-
309求调剂
已经有5人回复
-
292求调剂
已经有8人回复
-
求调剂
已经有4人回复
-
一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂
已经有3人回复
-
调剂310
已经有4人回复
zhaocy8903
木虫 (知名作家)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 3822.5
- 散金: 1238
- 红花: 17
- 帖子: 5798
- 在线: 1468.5小时
- 虫号: 636507
- 注册: 2008-10-25
- 专业: 微生物遗传育种学
★ ★ ★ ★
wh7690703(金币+1,VIP+0):我的NdeI保护碱基加了5个，HindIII加了3个，直接酶切发现很难切断。兄弟，有好的办法吗？ 6-9 22:30
wh7690703(金币+1,VIP+0): 6-9 22:30
wh7690703(金币+1,VIP+0):我的NdeI保护碱基加了5个，HindIII加了3个，直接酶切发现很难切断。兄弟，有好的办法吗？ 6-9 22:31
wh7690703(金币+1,VIP+0):NdeI加了5个保护碱基，HindIII加了3个。兄弟，有好的办法吗？ 6-9 22:31
wh7690703(金币+1,VIP+0):我的NdeI保护碱基加了5个，HindIII加了3个，直接酶切发现很难切断。兄弟，有好的办法吗？ 6-9 22:30
wh7690703(金币+1,VIP+0): 6-9 22:30
wh7690703(金币+1,VIP+0):我的NdeI保护碱基加了5个，HindIII加了3个，直接酶切发现很难切断。兄弟，有好的办法吗？ 6-9 22:31
wh7690703(金币+1,VIP+0):NdeI加了5个保护碱基，HindIII加了3个。兄弟，有好的办法吗？ 6-9 22:31
|
双酶切显然是首选，先连到T载体不但要增加操作还可能损失库容量 NdeI需要加入至少6个保护碱基,常用的HindIII也要三个 |
6楼2009-06-09 18:11:48
jdklgjldg
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 贵宾: 0.062
- 金币: 2686.1
- 帖子: 623
- 在线: 111小时
- 虫号: 236592
- 注册: 2006-04-03
- 性别: GG
- 专业: 肿瘤干细胞
2楼2009-06-09 13:30:52
3楼2009-06-09 14:25:47
susizheng
木虫 (著名写手)
我們是糖 甜到憂傷
- BioEPI: 8
- 应助: 130 (高中生)
- 贵宾: 0.008
- 金币: 4738.3
- 散金: 2273
- 红花: 56
- 帖子: 2308
- 在线: 740.7小时
- 虫号: 642666
- 注册: 2008-11-01
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
4楼2009-06-09 16:07:47
