24小时热门版块排行榜    

查看: 1093  |  回复: 3

二久

新虫 (初入文坛)

[交流] 包涵体溶解后根本过滤不下去 已有3人参与

包涵体用8M尿素溶解,离心之后,0.45虑膜根本无法过滤下去,一个虑膜撑死能过滤1ml,而且这样应该丢失的蛋白也很多,都快急死了,有什么好的解决办法吗

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zsygxh

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物版感谢您的关注与支持。 2019-11-04 19:35:42
溶解加还原剂,pH稍微高一点,然后搅拌溶解时间长一点,甚至最好溶解过夜,溶解体积倍数稍微大一点,应该会有帮助。如果后面不是要过离子柱纯化的话,可以换盐酸胍溶解。除非蛋白性质特殊,一般不会有太大问题。
2楼2019-11-04 17:00:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shengyansuo

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用6M GUA-HCL. 试试.
或者加20mm.dtt,ph9.0

发自小木虫Android客户端
3楼2019-11-05 21:27:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

SuYuo

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我遇到同样的问题,解决方法是:
先通过超声,搅拌等方法三充分溶解后,12000rpm离心10min,去除不溶物(理论上溶解了的不会被离心掉)
剩下的溶解离心后的上清再过滤,会相对容易过滤很多。
12
4楼2022-10-20 15:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 二久 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +7 羊腰板 2026-08-21 7/350 2026-08-21 21:28 by iwuli
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见