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tt1232028

铁虫 (小有名气)

[交流] 求助

我提质粒用的是超纯水(ph在6.0左右)溶解的,后又加上RNA酶处理,-20度保存。在做实验的时候,取了10微升DNA +30微升的PBS缓冲溶液(ph在7.4)+10微升的EDTA,DNA的浓度在100ng每微升,30分钟之后电泳,8微升的进样量,紫外下检测,没有任何条带。请问哪位大侠知道这是怎么回事,原因是什么?急!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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baisuilan

金虫 (正式写手)

质粒浓度太低了呗。
     原因呢,可能是提的时候就没提好。纯水溶的话,-20度反复冻融也是会降解的。
PS:跑电泳时加marker没有?没marker,没准是你电泳出问题了呢。跑反了,没EB,跑漏/过了,都有可能哦
8楼2009-06-08 00:43:39
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ilaveu

木虫 (著名写手)

DNA浓度在100ng/ul的话,只要1ul检测就应该很亮了
我们用的marker每条带才大约50ng/ul

你检测8ul都没有带
那应该是质粒没有提出来
3楼2009-06-07 22:54:26
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frank7709

新虫 (正式写手)

肯定是没提出来!怎么提的?试剂盒吗?
4楼2009-06-07 23:21:49
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xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋


tt1232028(金币+1,VIP+0): 7-1 14:21
提完应该先测下浓度啊,再电泳。省点事
俺说1ul就很亮的
第三军团
5楼2009-06-07 23:54:12
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