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环氧树脂偶联多肽求助。跪谢！！！
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最近想把一个 10aa的多肽偶联到环氧树脂上，多肽用灭菌水溶解后备用（10mg/ml），偶联缓冲液用0.2M的碳酸盐溶液PH9.2,溶胀0.4g树脂至约3ml 后(Bio-Rad)，将多肽5mg加入偶联缓冲液中,20℃,振荡过夜,用甘氨酸封闭活性位点，之后测偶联前后溶液中的多肽含量,方法是测220nm吸光度，结果偶联后与偶联前的结果差别特小，后续试验也没有结果，怀疑多肽就没有偶联上去，请问大家是什么原因，一般偶联的条件是什么？PH对偶联影响大吗，说明书上说pH9-13,我准备用PH10.7也不行，另外偶联缓冲液用哪种缓冲液，不同的缓冲液对偶联有没有影响？一般的注意事项我都知道了，还有什么比较重要的，特殊的注意事项，请大家帮忙？多谢了！ 听着挺好做啊，我咋就做不出来呢？ |
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