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虫虫笑了木虫 (小有名气)
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阳离子交换层析洗脱问题 已有1人参与
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| 最近使用阳离子交换柱 Fractogel预装柱纯化目的蛋白,使用0-1.5M盐进行阶段性的梯度洗脱,但是在10%,20%,30%,40%,50%梯度下均有出峰,且出峰正常,每个梯度下洗脱到基线然后才切换下一个梯度,最终电泳结果显示各个梯度下洗脱组分中均含有目的蛋白且浓度相当,求教这是怎么回事?难道是目的蛋白与填料的结合位点不同造成洗脱难度的差异所致么,如果目的蛋白与填料结合方式固定,应该在某一个梯度下就能完全洗脱下来,现在在每个梯度下均有很高的出峰,且都是单峰,求赐教!!!! |
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