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321wangke321金虫 (正式写手)
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转基因之前的问题
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请问各位,我准备转一个基因到番茄中,在选择载体和启动子方面有些疑惑,请大家帮忙看看。 1、载体选择。目前过表达载体目前很多,我手头只有35S::pcambio1300-YFP载体,这个载体有人转过番茄,但是转化效率不详; 2、启动子。由于该载体是35S启动子,有研究发现强外源基因的过表达会抑制植株的生长,那有没有更合适的启动子。很多人用基因自身的启动子或者化学诱导的启动子,不知道哪一种好一些; 3、标签。很多研究为了下游试验方便,如定位、CHIP、CoIP等,加入荧光蛋白或者myc等标签,这些标签的加入是否影响基因的表达或者基因的功能; 4、有没有其他注意事项。 |
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