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321wangke321

金虫 (正式写手)

[交流] 转基因之前的问题

请问各位,我准备转一个基因到番茄中,在选择载体和启动子方面有些疑惑,请大家帮忙看看。

1、载体选择。目前过表达载体目前很多,我手头只有35S::pcambio1300-YFP载体,这个载体有人转过番茄,但是转化效率不详;
2、启动子。由于该载体是35S启动子,有研究发现强外源基因的过表达会抑制植株的生长,那有没有更合适的启动子。很多人用基因自身的启动子或者化学诱导的启动子,不知道哪一种好一些;
3、标签。很多研究为了下游试验方便,如定位、CHIP、CoIP等,加入荧光蛋白或者myc等标签,这些标签的加入是否影响基因的表达或者基因的功能;
4、有没有其他注意事项。
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王者风范,一切皆有可能。
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聆蝶漫澄

新虫 (正式写手)

2楼2024-04-27 08:34:24
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聆蝶漫澄

新虫 (正式写手)

1,没有别的载体,又怀疑有的转化不祥。转化效率不应该是有多个载体,对比的时候考虑的吗。  只有一个,这个不转,是可以不用做了吗

发自小木虫Android客户端
3楼2024-04-27 08:35:43
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聆蝶漫澄

新虫 (正式写手)

2,有其他启动子的载体,一起做,确定会不会抑制。没做实验,只有思考,有谁能确定有没有问题呢。实验方案,都做,会解除自己的疑惑,

发自小木虫Android客户端
4楼2024-04-27 08:39:48
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