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jiafu23367金虫 (小有名气)
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[求助]
硅胶柱尺寸如何选择已有1人参与
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| 25g的粗样品如何上硅胶柱？硅胶用量是多大，柱子的尺寸如何选择，以及多少体积接一个馏分？？ @lifeliuyan |
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lazierboy
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【答案】应助回帖
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jiafu23367: 金币+10, ★★★很有帮助 2019-10-17 11:17:55
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jiafu23367: 金币+10, ★★★很有帮助 2019-10-17 11:17:55
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如果成分比较复杂的话，TLC就没有那么重要的。 这个时候我们的要求是粗分，只要极性分段就达到目的了。这时候硅胶用量就可以少一些，课本上说的是30-60倍，那么你用的硅胶就可以是750g或者更少，还得看你们实验室的柱子有哪些规格的。我们一般建议一个流分大约是死体积的五分之一到三分之一，一般是柱子用多少g硅胶，就多少ml一个流分，当然这也需要具体问题具体分析，另外每个人的习惯也不大一样。 过柱子粗分，就大胆的跳梯度，一般情况下一个梯度冲两三个死体积就可以换到下一个梯度了。 细分的话，还是用TLC监测来换梯度。 |
5楼2019-10-17 08:57:37
排骨
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你的粗品薄层板上有几个点？要是薄层上点太多就上硅胶柱分离的话会增加你的分离工作量。做分离的话薄层就是眼睛，多少体积接一个只有用薄层才能决定，要不然谁也无法回答你的问题。 发自小木虫Android客户端 |
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jiafu233672楼2019-10-16 23:51:34
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一看你提的问题你应该是研一的吧，除了本科实验课做教材上的实验外就没有具体接触过植化分离研究。你们实验室没有师兄师姐或者二老板吗？有的话多跟实验室的师兄师姐请教，先练练基本功，要不然你做课题要走很多弯路 发自小木虫Android客户端 |
3楼2019-10-16 23:56:30
lazierboy
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4楼2019-10-17 08:42:42