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jiafu23367

金虫 (小有名气)

[求助] 硅胶柱尺寸如何选择 已有1人参与

25g的粗样品如何上硅胶柱?硅胶用量是多大,柱子的尺寸如何选择,以及多少体积接一个馏分?? @lifeliuyan
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lazierboy

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
jiafu23367: 金币+10, ★★★很有帮助 2019-10-17 11:17:55
如果成分比较复杂的话,TLC就没有那么重要的。
这个时候我们的要求是粗分,只要极性分段就达到目的了。这时候硅胶用量就可以少一些,课本上说的是30-60倍,那么你用的硅胶就可以是750g或者更少,还得看你们实验室的柱子有哪些规格的。我们一般建议一个流分大约是死体积的五分之一到三分之一,一般是柱子用多少g硅胶,就多少ml一个流分,当然这也需要具体问题具体分析,另外每个人的习惯也不大一样。
过柱子粗分,就大胆的跳梯度,一般情况下一个梯度冲两三个死体积就可以换到下一个梯度了。
细分的话,还是用TLC监测来换梯度。
5楼2019-10-17 08:57:37
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排骨

木虫 (著名写手)

一看你提的问题你应该是研一的吧,除了本科实验课做教材上的实验外就没有具体接触过植化分离研究。你们实验室没有师兄师姐或者二老板吗?有的话多跟实验室的师兄师姐请教,先练练基本功,要不然你做课题要走很多弯路

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3楼2019-10-16 23:56:30
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by jiafu23367 at 2019-10-17 11:11:36
嗯嗯,那我先试下吧,再问下您,如果750g硅胶装柱的话,大概用什么尺寸的柱子?因为我刚开始都是用的300×30mm的小型柱子,没这方面经验...

看看你们实验室的柱子有哪些规格的,可以装多少硅胶都是经验,问问师兄师姐  也不一定要750g   具体问题具体分析
1  理论知识要有
2 理论联系实际
3 多与人交流
8楼2019-10-17 11:26:42
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普通回帖

排骨

木虫 (著名写手)

你的粗品薄层板上有几个点?要是薄层上点太多就上硅胶柱分离的话会增加你的分离工作量。做分离的话薄层就是眼睛,多少体积接一个只有用薄层才能决定,要不然谁也无法回答你的问题。

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2019-10-16 23:51:34
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 排骨 at 2019-10-16 23:51:34
你的粗品薄层板上有几个点?要是薄层上点太多就上硅胶柱分离的话会增加你的分离工作量。做分离的话薄层就是眼睛,多少体积接一个只有用薄层才能决定,要不然谁也无法回答你的问题。
...

薄层上点太多不是很正常嘛 如果是天然产物的话
4楼2019-10-17 08:42:42
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jiafu23367

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 排骨 at 2019-10-16 23:51:34
你的粗品薄层板上有几个点?要是薄层上点太多就上硅胶柱分离的话会增加你的分离工作量。做分离的话薄层就是眼睛,多少体积接一个只有用薄层才能决定,要不然谁也无法回答你的问题。
...

嗯 我薄层用的 二氯甲烷、甲醇展开剂。板子上总共七个点。而且距离都很近。想问下这种怎么处理?适合用硅胶粗分吗
6楼2019-10-17 11:08:25
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jiafu23367

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lazierboy at 2019-10-17 08:57:37
如果成分比较复杂的话,TLC就没有那么重要的。
这个时候我们的要求是粗分,只要极性分段就达到目的了。这时候硅胶用量就可以少一些,课本上说的是30-60倍,那么你用的硅胶就可以是750g或者更少,还得看你们实验室的 ...

嗯嗯,那我先试下吧,再问下您,如果750g硅胶装柱的话,大概用什么尺寸的柱子?因为我刚开始都是用的300×30mm的小型柱子,没这方面经验
7楼2019-10-17 11:11:36
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李颖-华工

新虫 (初入文坛)

老师,您好,我们用60乙醇提取黄酮,之后浓缩冻干。用TLC来试试,用了二氯甲烷和甲醇体系,调节不同比例时,发现没有变化,都是一条线,怎么回事呢?

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9楼2021-04-05 16:32:25
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杜子夏184

新虫 (小有名气)

只要TLC分的够开,很短就能过出来

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10楼2021-04-08 15:02:26
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