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关于hela细胞同步化的问题
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自己用thymidine24h+release3h+nocodazole12h的protocol做hela的同步化，初始细胞密度3成左右，做成功了一次（没有用流式来检验，但是镜检几乎所有细胞都变的又圆又亮）后面换l了另外一批的hela，其他条件都一样（可能初始密度会比3成高一点，但是没有到4成，4成是protocol推荐的上限）就再也没有做成功了（做了同步化的和对照的没有任何的区别），会是细胞株的原因吗？ 另外我想问一下诸位有经验的虫子：镜检thymidine处理过和没有处理过的细胞有什么区别？我猜测被thymidine处理过的细胞应给被block在S期，所以镜检时所有细胞应该都是贴壁的伸展不规则形状，不会有又圆又亮的M期的形状。不知道对不对？ 而不经过thymidine处理直接用nocodazole处理细胞是不是细胞都会死掉？因为我猜测在细胞的其他时相，微管有其他作用，把微管解聚，不在从S-G2-M的细胞应该是活不了的。 |
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