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sy0621

新虫 (小有名气)

[求助] 大肠杆菌平板计数,涂板不长菌 已有2人参与

目前在做大肠杆菌平板计数实验,原菌液测Abs=0.8,可是稀释一系列梯度后,将溶液混匀取100uL涂板,37℃孵育后不见长菌,请问是什么原因呢?(用灭菌的0.9%氯化钠稀释)
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sy0621

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 张香玲1017 at 2019-10-16 14:03:11
平时也用0.9%氯化钠溶液稀释,没有什么问题,一考虑是不是选择的稀释倍数不合适,建议先从-1到-10(或其它)试试;二考虑是不是培养时间上不够,平时培养24+-1hr,可以增加到48hr试下。

目前试了10-1到10-8都没长菌,孵育2天也没有,稀释液换成灭菌水应该可以不会让细菌死掉吧?
8楼2019-10-16 14:05:33
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金刚太郎

新虫 (小有名气)

平板和摇瓶培养基成分是否一致?稀释液是不是不合适?(我都是用用磷酸缓冲液稀释的,效果很好)

发自小木虫Android客户端
2楼2019-10-16 12:52:58
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sy0621

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 金刚太郎 at 2019-10-16 12:52:58
平板和摇瓶培养基成分是否一致?稀释液是不是不合适?(我都是用用磷酸缓冲液稀释的,效果很好)

一样的,你用的PBS吗?pH=7.4吗?用水可以吗?
3楼2019-10-16 13:43:25
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安静de执着14

新虫 (著名写手)

是不是稀释度太高了?一般用LB培养基就培养大肠杆菌,你用的什么培养基?大肠杆菌是营养缺陷型还是野生型?

发自小木虫Android客户端
4楼2019-10-16 13:55:35
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