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木冰衿→_→新虫 (正式写手)
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[求助]
衡量催化能力的话，请问酶活和比酶活我应该看哪个指标呢？ 已有2人参与
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最近在全物种找催化能力最强的某种酶，想大肠杆菌表达出酶做催化，但是不知道应该看哪个指标才能衡量催化能力。 1. 得到的指导是说看SPECIFIC ACTIVITY 也就是比活，但是我查了下比活是衡量纯度的指标，用在这里是否不妥？ 2. 因为我催化想用粗酶液，而查到的文献大多用纯化后的酶测量的数据，所以提纯过和没提纯过的酶的比活是否不同？文献的数据是否有参考意义？ 3. 如果不能用比活，那么我应该查找什么指标衡量酶的催化能力？@hc-material |
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木冰衿→_→
新虫 (正式写手)
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送红花一朵 3楼2020-01-15 17:06:53
原海亮
木虫 (著名写手)
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- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
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如果是作为酶催化能力的体现，当然是要选择酶活来衡量，包括在实际的工业生产应用中，计算酶使用量的时候，一般都是催化一定量的底物，需要多少酶活来计算，不会使用比活力。 也如你所讲，比活在某种意义上就是一个纯度的体现，即每单位酶产品所具有的酶活，打个比方，一个反应需要1000U的酶，你用比活力低的粗酶液，可能需要加入10g的量才能达到酶活总量（比活是100U/g），而如果使用比活较高的纯化后蛋白，纯度高，单位质量含有的酶蛋白量要比粗酶液高，可能加个1g就可以了（比活是1000U/g）。 而目前工业酶的使用中，很少使用纯化后的蛋白，成本太高，绝大多数还是使用粗酶液或者粗酶粉，你看的文献都是科研院所实验室进行科学研究的成果，他们不考虑成本的，可以使用昂贵的纯化填料以及设备等等，为的是获得一个准确的理论研究数据，比活越高证明他们获得的产品纯度或者含量越高。但实际应用中，还是需要考虑各种实际成本（附加值高的产品除外）。 |
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2楼2020-01-15 10:06:03
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最关键的是看Km值，不是比活，我是生产酶的工厂：只要酶有活性就是有酶活，就不用检测这个指标了，除非你生产的没有活性~比活是酶纯度的意思：1mg广义上的酶(冻干酶里面有缓冲盐份)，有多少酶单位；对于底物确定的酶，酶的质量若要好看Km：达到最大反应速度一半时底物的浓度 发自小木虫Android客户端 |
4楼2020-05-19 14:24:03
【答案】应助回帖
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最关键的是看Km值，不是比活，我是生产酶的工厂：只要酶有活性就是有酶活，就不用检测这个指标了，除非你生产的没有活性~比活是酶纯度的意思：1mg广义上的酶(冻干酶里面有缓冲盐份)，有多少酶单位；对于底物确定的酶，酶的质量若要好看Km：达到最大反应速度一半时底物的浓度 发自小木虫Android客户端 |
5楼2020-05-19 14:24:39