24小时热门版块排行榜    

查看: 956  |  回复: 7
当前主题已经存档。

zbl0413

铜虫 (初入文坛)

[交流] 消化Hela细胞

消化Hela细胞一般要多长时间,消化液是不是要加EDTA(是钠盐还是直接是酸)?我在消化的时候,用的是没有加EDTA的消化液,37度下放置15min,都没什么效果啊!!!!!
回复此楼
交流经验,共同进步
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

350784478

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那你加EDTA试一下,要是还不行,一个可能是你的酶浓度太低,另外一个就很可能是你的酶问题了。我以前也遇到这样的情况,细胞就是消化不下来,后来查出原因了,是酶的问题,换了酶,消化特别好。EDTA只是螯合金属离子,使酶充分发挥活力。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
2楼2009-06-04 21:33:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cauzhangtao

木虫 (正式写手)

消化的话
加点edte钠比较容易下来
但是时间你得掌握好
呵呵
3楼2009-06-04 22:19:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先用PBS 洗一遍,再消化,会快很多,不行放37°
4楼2009-06-04 23:57:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

琉璃湖畔

木虫 (正式写手)

不太懂耶  帮你顶顶
淡定淡定,须知努力就好
5楼2009-06-04 23:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qwj_1001

木虫 (著名写手)

EDTA是酸,乙二胺四乙酸
EDTANa2是盐
明白了吧楼主
我们来自五湖四海为了一个目标聚集在这里,使我们获得知识。
6楼2009-06-05 08:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sebastian

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主你用的是多大浓度的trypsin啊? 我一般用0.25%的消化2分钟(trypsin可以不用37C预热,用之前拿出室温放一会,用的时候再用手握一会就可以了,我的一个师姐说反复4C-37C-4C-37C对trypsin寿命有影响),效果挺好。以前用0.05%的消化一次,用枪吹来了半天就下来40%左右,细胞状态还受很大影响。
7楼2009-06-05 21:23:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zbl0413

铜虫 (初入文坛)

浓度是0.25%,不过不是太准确,加了EDTA后消化时间是快了,但是还是要5min左右(37C)。
交流经验,共同进步
8楼2009-06-07 16:18:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zbl0413 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 5/250 2026-08-16 18:38 by lxmichacl
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见