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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 消化Hela细胞
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zbl0413

铜虫 (初入文坛)

[交流] 消化Hela细胞

消化Hela细胞一般要多长时间，消化液是不是要加EDTA（是钠盐还是直接是酸）？我在消化的时候，用的是没有加EDTA的消化液，37度下放置15min,都没什么效果啊！！！！！
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交流经验，共同进步
1楼 2009-06-04 21:10:05
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350784478

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
那你加EDTA试一下，要是还不行，一个可能是你的酶浓度太低，另外一个就很可能是你的酶问题了。我以前也遇到这样的情况，细胞就是消化不下来，后来查出原因了，是酶的问题，换了酶，消化特别好。EDTA只是螯合金属离子，使酶充分发挥活力。
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朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
2楼2009-06-04 21:33:45
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
消化的话
加点edte钠比较容易下来
但是时间你得掌握好
呵呵
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3楼2009-06-04 22:19:55
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先用PBS 洗一遍，再消化，会快很多，不行放37°
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4楼2009-06-04 23:57:46
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琉璃湖畔

木虫 (正式写手)
不太懂耶  帮你顶顶
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淡定淡定，须知努力就好
5楼2009-06-04 23:59:25
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qwj_1001

木虫 (著名写手)
EDTA是酸，乙二胺四乙酸
EDTANa2是盐
明白了吧楼主
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我们来自五湖四海为了一个目标聚集在这里，使我们获得知识。
6楼2009-06-05 08:20:11
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Sebastian

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主你用的是多大浓度的trypsin啊？ 我一般用0.25%的消化2分钟（trypsin可以不用37C预热，用之前拿出室温放一会，用的时候再用手握一会就可以了，我的一个师姐说反复4C-37C-4C-37C对trypsin寿命有影响），效果挺好。以前用0.05%的消化一次，用枪吹来了半天就下来40%左右，细胞状态还受很大影响。
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7楼2009-06-05 21:23:04
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zbl0413

铜虫 (初入文坛)
浓度是0.25%，不过不是太准确，加了EDTA后消化时间是快了，但是还是要5min左右（37C）。
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交流经验，共同进步
8楼2009-06-07 16:18:55
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