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zbl0413

铜虫 (初入文坛)

[交流] 消化Hela细胞

消化Hela细胞一般要多长时间,消化液是不是要加EDTA(是钠盐还是直接是酸)?我在消化的时候,用的是没有加EDTA的消化液,37度下放置15min,都没什么效果啊!!!!!
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Sebastian

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
楼主你用的是多大浓度的trypsin啊? 我一般用0.25%的消化2分钟(trypsin可以不用37C预热,用之前拿出室温放一会,用的时候再用手握一会就可以了,我的一个师姐说反复4C-37C-4C-37C对trypsin寿命有影响),效果挺好。以前用0.05%的消化一次,用枪吹来了半天就下来40%左右,细胞状态还受很大影响。
7楼2009-06-05 21:23:04
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查看全部 8 个回答

350784478

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
那你加EDTA试一下,要是还不行,一个可能是你的酶浓度太低,另外一个就很可能是你的酶问题了。我以前也遇到这样的情况,细胞就是消化不下来,后来查出原因了,是酶的问题,换了酶,消化特别好。EDTA只是螯合金属离子,使酶充分发挥活力。
朝为田舍郎,暮登天子堂。将相本无种,男儿当自强。
2楼2009-06-04 21:33:45
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)

消化的话
加点edte钠比较容易下来
但是时间你得掌握好
呵呵
3楼2009-06-04 22:19:55
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先用PBS 洗一遍,再消化,会快很多,不行放37°
4楼2009-06-04 23:57:46
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