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质粒大提加入异丙醇没有沉淀已有1人参与
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今天用QIAGEN 的MEGA 试剂盒做了大提，在洗脱液加入异丙醇后可以见到有玻璃状的东西漂浮，然后我在4度冰箱里放置了大概两个多小时后再12000rpm ，30min，4度 离心后管壁什么都没有，我把液体倒出来看也没看到有沉淀，之后用70%乙醇洗涤同样条件离心后发现也什么都没有，想请问问题到底出在哪里呢？查了资料也看到说是因为我的异丙醇和我的洗脱液没有混匀，但也不可能一点沉淀也没有吧，这个是否和离心管也有关？我用的高速离心用的圆底的厚壁离心管，加上异丙醇沉淀的质粒DNA 本身就是吸附不牢靠所以被倒出来了，不过我在我倒出来的液体里也真没看到任何沉淀物，或者是我洗脱的质粒DNA 量本来就不够？！这个试剂盒的过柱太麻烦了，做了一天没有东西希望大家提点意见！卑微.jpg 发自小木虫IOS客户端 |
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