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哈娜酱

木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1877.9
沙发: 1
帖子: 845
在线: 101.9小时
虫号: 5598855
注册: 2017-02-16
性别: MM
专业: 中药药效物质

[求助] 想请教酶催化反应的IC50可否用液相来测定呢？已有1人参与

如题，最近在做β-分泌酶抑制剂，需要测IC50，查了诸多文献都是用荧光或者紫外分光光度计，能否用液相通过测定底物减少量来计算IC50呢？如有文献感激不尽啦

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1楼 2019-09-27 19:56:02

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

应助: 232 (大学生)
金币: 4607.4
散金: 3521
红花: 33
帖子: 1804
在线: 375.4小时
虫号: 1392705
注册: 2011-09-06
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

一般都是做成相应的elisa来检测的，这样可以直接的反应抑制剂与酶蛋白的结合，紫外和荧光是常用的两种方法，具体是根据检测标记物的特性选择合适方检测方法和波长。
通过液相检测目标酶蛋白催化能力的变化，即底物消耗量的变化来反映抑制剂的作用效果，相对来讲是一个间接的方法，但影响酶活力的因素不只有酶抑制剂，还有很多其他因素，所以获得的数据可以定性看，量化起来没有标准的公式来计算。
IC50是一个大家常用的一个参数，应该有其适用性和通用性，所以还是使用最直接的反应抑制剂与酶蛋白结合的方法较多一些。

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天空才是极限，我有信心飞的更高！

2楼2020-01-15 10:28:19