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哈娜酱

木虫 (正式写手)

[求助] 想请教酶催化反应的IC50可否用液相来测定呢?已有1人参与

如题,最近在做β-分泌酶抑制剂,需要测IC50,查了诸多文献都是用荧光或者紫外分光光度计,能否用液相通过测定底物减少量来计算IC50呢?如有文献感激不尽啦

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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

一般都是做成相应的elisa来检测的,这样可以直接的反应抑制剂与酶蛋白的结合,紫外和荧光是常用的两种方法,具体是根据检测标记物的特性选择合适方检测方法和波长。
通过液相检测目标酶蛋白催化能力的变化,即底物消耗量的变化来反映抑制剂的作用效果,相对来讲是一个间接的方法,但影响酶活力的因素不只有酶抑制剂,还有很多其他因素,所以获得的数据可以定性看,量化起来没有标准的公式来计算。
IC50是一个大家常用的一个参数,应该有其适用性和通用性,所以还是使用最直接的反应抑制剂与酶蛋白结合的方法较多一些。
天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2020-01-15 10:28:19
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