24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 764  |  回复: 8
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

[交流] 【求助】请教RTPCR达人试验成功率如何?

如题,最近一直苦于用PCR来给基因组中的某基因进行相对定量,发现试验数据基本不靠谱,因试验原理与实时定量PCR有许多相似之处,故请教各位达人,RT-PCR试验的成功率如何,做多少次才能出一次像样的结果?
回复此楼

» 猜你喜欢

金币是赌出来的
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baisuilan

金虫 (正式写手)


wjswj(金币+1,VIP+0):谢谢了 6-8 10:55
老实说,我做RT那么多次了,每次结果都忽高忽低。但是有一点是肯定的,如果你的两个基因的确存在较大差异,还是能看出规律来的。比如我的基因用siRNA抑制之后,每次结果都是对照的20%左右,非常明显。
如果二者差异不那么大,那就难说了。可能第一次差上百倍,第二次差一两倍,第三次又成了另一个高了。
5楼2009-06-05 10:31:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)

你做的是 real time 还是普通RT?
2楼2009-06-05 05:30:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Shengjing

铁虫 (初入文坛)

你应该指的是real time PCR吧。

这个很难说,看你的实验设计,要做的基因是什么。说的详细一点让大家好讨论啊。
3楼2009-06-05 08:32:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

实时定量PCR,非反转录PCR。举例,在某生物基因组内,理论上x基因的拷贝数是y基因拷贝数的2倍,通过优化引物PCR条件等手段想在实时定量PCR上反映出x与y的关系(即x:y=2:1)。请问这种试验的理想结果出现的次数能占所作试验的总次数的多少啊?
金币是赌出来的
4楼2009-06-05 09:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中国科学院上海有机所,有机化学356分找调剂 +12 Nadiums 2026-04-09 13/650 2026-04-14 17:54 by lhj2009
[考研] 08工学 309分求调剂 +12 Yin DY 2026-04-08 12/600 2026-04-14 17:49 by lhj2009
[考研] 085404 298分求调剂 +11 呼啦呼啦呼呼呼 2026-04-10 12/600 2026-04-14 08:38 by wfj257
[考研] 332求调剂 +15 蕉蕉123 2026-04-10 15/750 2026-04-13 23:12 by pies112
[基金申请] 2026 WR青拔 +3 冬日阳光CAS 2026-04-09 6/300 2026-04-13 18:40 by liuchb715
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[考研] 307求调剂 +10 tzq94092 2026-04-10 10/500 2026-04-12 08:18 by wise999
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 0860004 求调剂 309分 +9 Yin DY 2026-04-08 9/450 2026-04-11 22:55 by dongdian1
[考研] 085400 328分 求调剂 +10 喂你一个大橙子 2026-04-09 14/700 2026-04-11 19:53 by lqspecial
[考研] 283求调剂,工科! +12 苏打水7777 2026-04-08 12/600 2026-04-11 10:28 by 逆水乘风
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 一志愿华东师范生物学326分,求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 招收有机化学、化工,药学,食品灯专业学生 +3 yrfhjgdj 2026-04-08 3/150 2026-04-09 10:15 by QYQX_123
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
信息提示
请填处理意见