应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » CRISPRCas9基因敲除需要加入donor DNA吗
81/1返回列表
查看: 1830  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wxsj110

新虫 (初入文坛)

[求助] CRISPRCas9基因敲除需要加入donor DNA吗 已有2人参与

请问使用CRISPR Cas9进行基因敲除，DNA双链断裂后需要加入donor DNA吗。感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-09-23 09:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ELF1

新虫 (小有名气)
一般都是需要的

发自小木虫Android客户端
回复此楼
2楼2019-09-23 11:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-09-23 20:39:34
knockout一般不需要donor dna，knockin或者mutation需要修复模板进行同源重组。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wxsj110
2019更好更棒!
3楼2019-09-23 12:08:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxsj110

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by GRUBBY_WU at 2019-09-23 12:08:12
knockout一般不需要donor dna，knockin或者mutation需要修复模板进行同源重组。

谢谢!  我有一点不明白，基因敲除靶基因双链DNA断裂，不会自动复原吗，是如何造成靶基因被knockout的呢？
赞一下 回复此楼
4楼2019-09-23 14:54:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★ ★
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-09-23 20:39:51
本帖仅楼主可见
赞一下
5楼2019-09-23 16:07:37
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wxsj110 at 2019-09-23 14:54:25
谢谢!  我有一点不明白，基因敲除靶基因双链DNA断裂，不会自动复原吗，是如何造成靶基因被knockout的呢？...

如果不加donor dna（修复模板），双链断裂的DNA会进行非同源末端链接（NHEJ）的修复方式，有一定概率会引入insert或delete，这种变化会造成功能基因失活。
赞一下(1人) 回复此楼
2019更好更棒!
6楼2019-09-24 12:40:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小小香

新虫 (小有名气)
加同源重组片段更加靠谱

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2019-09-27 22:45:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我太秀了

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果是细胞系做knockout的话，不需要加入donor的，做Knockin或者mutation就需要的；如果是菌的基因编辑，一般都是需要加donor的
赞一下(1人) 回复此楼
专注细胞和微生物基因编辑知识分享
8楼2020-04-13 10:32:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wxsj110 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703 东华大学 理学化学均过 a 线，总分 281 求调剂 +4 香香 Lu 2026-03-03 8/400 2026-03-05 17:36 by 香香 Lu
[考研] 306求调剂 +3 Bahati 2026-03-05 3/150 2026-03-05 17:02 by zhukairuo
[考研] 0856材料求调剂 +17 hyf hyf hyf 2026-02-28 18/900 2026-03-05 09:32 by oxidpl
[考研] 320材料一志愿西工大专硕英二数二 有两年光伏工作经验 +5 锤某人 2026-03-04 8/400 2026-03-05 09:24 by oxidpl
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-05 5/250 2026-03-05 08:19 by ms629
[考研] 化学工程求调剂 +10 化工人999 2026-03-04 10/500 2026-03-04 21:21 by zhukairuo
[考研] 282求调剂 +5 2103240126 2026-03-02 8/400 2026-03-04 17:29 by 妄深于海
[考研] 295求调剂 +4 小赛不吃香菜 2026-03-04 4/200 2026-03-04 16:13 by sslc1985
[考研] 292求调剂 +9 yhk_819 2026-02-28 9/450 2026-03-04 16:06 by sslc1985
[考研] 0703化学调剂 +4 G212 2026-03-03 5/250 2026-03-04 09:34 by 每天只摆一小会
[考研] 085600求调剂 +4 LRZZZZZZ 2026-03-02 6/300 2026-03-04 09:11 by 无际的草原
[考博] 26申博 求博导 +3 爱读书的小帅 2026-02-28 5/250 2026-03-03 22:17 by 远方13579
[考研] 298求调剂 +3 人间唯你是清欢 2026-03-03 4/200 2026-03-03 18:09 by ms629
[考研] 266材料化工求调剂 +3 哇塞王帅 2026-03-03 3/150 2026-03-03 17:58 by houyaoxu
[考研] 一志愿中科大能动297求调剂，本科川大 +3 邵11 2026-03-03 3/150 2026-03-03 14:50 by 新能源达人
[考研] 0856调剂 +10 刘梦微 2026-02-28 10/500 2026-03-02 23:42 by hcy618
[考研] 306分材料调剂 +5 chuanzhu川烛 2026-03-01 6/300 2026-03-02 19:51 by 张晓芳0105
[考研] 材料085601调剂 +5 多多子. 2026-03-02 5/250 2026-03-02 19:15 by zhukairuo
[考研] 一志愿中石油（华东）本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-02 3/150 2026-03-02 18:54 by caszguilin
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭