应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » CRISPRCas9基因敲除需要加入donor DNA吗
汕头大学海洋科学接受调剂
81/1返回列表
查看: 1948  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wxsj110

新虫 (初入文坛)

[求助] CRISPRCas9基因敲除需要加入donor DNA吗 已有2人参与

请问使用CRISPR Cas9进行基因敲除，DNA双链断裂后需要加入donor DNA吗。感谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-09-23 09:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ELF1

新虫 (小有名气)
一般都是需要的

发自小木虫Android客户端
回复此楼
2楼2019-09-23 11:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-09-23 20:39:34
knockout一般不需要donor dna，knockin或者mutation需要修复模板进行同源重组。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wxsj110
2019更好更棒!
3楼2019-09-23 12:08:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxsj110

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by GRUBBY_WU at 2019-09-23 12:08:12
knockout一般不需要donor dna，knockin或者mutation需要修复模板进行同源重组。

谢谢!  我有一点不明白，基因敲除靶基因双链DNA断裂，不会自动复原吗，是如何造成靶基因被knockout的呢？
赞一下 回复此楼
4楼2019-09-23 14:54:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★ ★
myprayer: 金币+3, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-09-23 20:39:51
本帖仅楼主可见
赞一下
5楼2019-09-23 16:07:37
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wxsj110 at 2019-09-23 14:54:25
谢谢!  我有一点不明白，基因敲除靶基因双链DNA断裂，不会自动复原吗，是如何造成靶基因被knockout的呢？...

如果不加donor dna（修复模板），双链断裂的DNA会进行非同源末端链接（NHEJ）的修复方式，有一定概率会引入insert或delete，这种变化会造成功能基因失活。
赞一下(1人) 回复此楼
2019更好更棒!
6楼2019-09-24 12:40:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小小香

新虫 (小有名气)
加同源重组片段更加靠谱

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2019-09-27 22:45:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我太秀了

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果是细胞系做knockout的话，不需要加入donor的，做Knockin或者mutation就需要的；如果是菌的基因编辑，一般都是需要加donor的
赞一下(1人) 回复此楼
专注细胞和微生物基因编辑知识分享
8楼2020-04-13 10:32:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wxsj110 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297求调剂 +21 ORCHID1 2026-04-10 23/1150 2026-04-13 15:22 by 张zhihao
[考研] 材料299专硕求调剂 +13 +21 2026-04-09 13/650 2026-04-13 14:16 by 张zhihao
[考研] 一志愿厦大生物学332求调剂 +11 池池池池池池 2026-04-08 11/550 2026-04-13 14:10 by 科研论
[考研] 化工学硕 285求调剂 +29 Wisjxn 2026-04-07 29/1450 2026-04-13 13:47 by floriea
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +19 ioodiiij 2026-04-08 19/950 2026-04-13 13:03 by 风雨无晴
[教师之家] 山东双非院校考核超级无底线，领导幸灾乐祸，教师遭殃恐 +3 qut2026 2026-04-11 7/350 2026-04-12 20:24 by qut2026
[考研] 280求调剂 +7 兮兮夜夜 2026-04-09 10/500 2026-04-12 00:33 by 蓝云思雨
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 298求调剂 +5 残荷新柳 2026-04-07 5/250 2026-04-11 11:02 by 紫曦紫棋
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 298求调剂 +13 钉叮咚冬瓜 2026-04-09 13/650 2026-04-10 15:49 by jiajinhpu
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 08工学 309分求调剂 +6 Yin DY 2026-04-08 6/300 2026-04-10 09:18 by Delta2012
[考研] 考研调剂 +13 冰冰，，， 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 求调剂材料科学与工程一志愿985初试365分 +5 材化李可 2026-04-08 5/250 2026-04-09 17:00 by Lilly_Li
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 求调剂 +11 wwwwabcde 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:16 by JourneyLucky
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭