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分子小白呀

新虫 (小有名气)

[交流] PCR无条带 已有4人参与

我连接转化后的菌液，放4度冰箱差不多有两个月了，今天重新涂了平板，蓝白斑筛选后，按正常程序跑了PCR，电泳，PCR Mix用的新买的康为2xEs Tap MasterMix，跑了100多个菌液的样，但是没有一条条带，请问是哪里出了问题呢？菌液放太久不能用了吗？分子新手，求助高人指导

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1楼 2019-09-18 20:37:30
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pl19940314

银虫 (正式写手)
一般你之前跑过有的，后面应该都在，除非。你没连接上

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-开心，爽朗。愉悦
2楼2019-09-19 00:22:36
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z457634588

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你猜两个月质粒在抗生素逐渐消耗完的情况下会不会丢失？

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3楼2019-09-19 15:35:09
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格洛米吃草

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主问题找到什么原因了吗
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4楼2023-08-24 11:38:01
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if mine

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
真要分析的话，可能性还挺多的。如果质粒没有丢失，蓝白斑实验也可能出现假阳。质粒丢失的话，抗性失效，如果你倒平板的LB温度过高，抗生素失效了，菌落也能长起来，你再去p，肯定啥也没有。个人觉得还是放的时间太长了，质粒丢失。反正自己慢慢排除故障因素吧，如果都没问题，换个酶试试？康为的我没用过，最近试用了个公司的酶，效果挺好的。哪家我就不说了，省得说我是托，想讨论的私信我吧
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5楼2023-09-01 09:04:58
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