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wnn王宁宁

新虫 (小有名气)

[求助] 在做石斛多糖,需要知道多糖的波长,用水溶解后,用紫外分光光度... 已有1人参与

在做石斛多糖,需要知道多糖的波长,用水溶解后,用紫外分光光度计全波长扫描200-800纳米,以蒸馏水做空白对照,没有出峰,请问这样做是有什么问题吗? @klicking

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至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
多糖一般用示差折光检测器,多糖在紫外-可见区间没有吸收的。
归零
2楼2019-09-16 23:37:01
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wnn王宁宁

新虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by klicking at 2019-09-16 23:37:01
多糖一般用示差折光检测器,多糖在紫外-可见区间没有吸收的。

那我把多糖在HSCCC上分离时,使用的是紫外检测器,那是不是也不会出峰。还有的文献上是195nm在紫外分光光度计上出峰,请问195nm是它的特征吸收峰吗?

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3楼2019-09-17 09:18:52
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至尊木虫 (著名写手)

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3楼: Originally posted by wnn王宁宁 at 2019-09-17 09:18:52
那我把多糖在HSCCC上分离时,使用的是紫外检测器,那是不是也不会出峰。还有的文献上是195nm在紫外分光光度计上出峰,请问195nm是它的特征吸收峰吗?
...

是呢,200+都不会出峰。195nm会出峰,但响应很低,灵敏度很差,我之前试过。有文献之所以采用195nm测,是因为那个时代,示差或者蒸发光散射检测器国内基本没有,所以不得已为之采用195nm检测,牺牲灵敏度。如果是要发文章或者研究论文或者定量检测,还是不要用195nm紫外测;如果仅是实验室研究辅助定性,倒是可以试试195nm,比起示差的确方便许多,对环境要求也不高,但仅局限于参考,现在的技术条件下,几乎没有第三方都还会接受这种测定模式了。
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4楼2019-09-17 11:13:15
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wnn王宁宁

新虫 (小有名气)

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4楼: Originally posted by klicking at 2019-09-17 11:13:15
是呢,200+都不会出峰。195nm会出峰,但响应很低,灵敏度很差,我之前试过。有文献之所以采用195nm测,是因为那个时代,示差或者蒸发光散射检测器国内基本没有,所以不得已为之采用195nm检测,牺牲灵敏度。如果是要 ...

多谢老师,那我分离多糖时,还能使用紫外检测器来确定波长检测吗?那这样误差会很大吗?

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5楼2019-09-17 12:38:21
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至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wnn王宁宁 at 2019-09-17 12:38:21
多谢老师,那我分离多糖时,还能使用紫外检测器来确定波长检测吗?那这样误差会很大吗?
...

不用,直接用195就可以了。太低噪音增加,接近200灵敏度又降低很多。
归零
6楼2019-09-17 13:19:57
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wnn王宁宁

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by klicking at 2019-09-17 13:19:57
不用,直接用195就可以了。太低噪音增加,接近200灵敏度又降低很多。...

您的意思是,我的多糖紫外检测器的检测波长可以设置为195nm吗?但低于200nm就属于远紫外了,这样误差会不会很大呀。

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7楼2019-09-17 15:43:37
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至尊木虫 (著名写手)

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7楼: Originally posted by wnn王宁宁 at 2019-09-17 15:43:37
您的意思是,我的多糖紫外检测器的检测波长可以设置为195nm吗?但低于200nm就属于远紫外了,这样误差会不会很大呀。
...

是呢,可以呢。误差的确很大,含测高浓度还可以接受,低浓度就别考虑了。
归零
8楼2019-09-17 22:10:19
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