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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 分析 » klicking » 在做石斛多糖，需要知道多糖的波长，用水溶解后，用紫外分光光度...
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wnn王宁宁

新虫 (小有名气)

[求助] 在做石斛多糖，需要知道多糖的波长，用水溶解后，用紫外分光光度...已有1人参与

在做石斛多糖，需要知道多糖的波长，用水溶解后，用紫外分光光度计全波长扫描200-800纳米，以蒸馏水做空白对照，没有出峰，请问这样做是有什么问题吗？ @klicking

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1楼2019-09-16 23:23:32
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多糖一般用示差折光检测器，多糖在紫外-可见区间没有吸收的。
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2楼2019-09-16 23:37:01
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klicking

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wnn王宁宁 at 2019-09-17 09:18:52
那我把多糖在HSCCC上分离时，使用的是紫外检测器，那是不是也不会出峰。还有的文献上是195nm在紫外分光光度计上出峰，请问195nm是它的特征吸收峰吗？
...

是呢，200+都不会出峰。195nm会出峰，但响应很低，灵敏度很差，我之前试过。有文献之所以采用195nm测，是因为那个时代，示差或者蒸发光散射检测器国内基本没有，所以不得已为之采用195nm检测，牺牲灵敏度。如果是要发文章或者研究论文或者定量检测，还是不要用195nm紫外测；如果仅是实验室研究辅助定性，倒是可以试试195nm，比起示差的确方便许多，对环境要求也不高，但仅局限于参考，现在的技术条件下，几乎没有第三方都还会接受这种测定模式了。
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4楼2019-09-17 11:13:15
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klicking

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wnn王宁宁 at 2019-09-17 12:38:21
多谢老师，那我分离多糖时，还能使用紫外检测器来确定波长检测吗？那这样误差会很大吗？
...

不用，直接用195就可以了。太低噪音增加，接近200灵敏度又降低很多。
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6楼2019-09-17 13:19:57
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klicking

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wnn王宁宁 at 2019-09-17 15:43:37
您的意思是，我的多糖紫外检测器的检测波长可以设置为195nm吗？但低于200nm就属于远紫外了，这样误差会不会很大呀。
...

是呢，可以呢。误差的确很大，含测高浓度还可以接受，低浓度就别考虑了。
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8楼2019-09-17 22:10:19
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