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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大肠杆菌转化中碰到的问题，请指教！
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香菱儿

铁杆木虫 (著名写手)
不好意思，发错帖子了


[ Last edited by 香菱儿 on 2009-6-9 at 23:35 ]
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漫洒英雄泪，相离处士家。谢慈悲剃度在莲台下。没缘法转眼分离乍。赤条条来去无牵挂。那里讨烟蓑雨笠卷单行？一任俺芒鞋破钵随缘化！
21楼2009-06-09 23:28:40
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松竹

金虫 (正式写手)
最可能的原因是：你想培养基加Amp时太热，使其失活了，所以长出来的假阳性比较多！
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22楼2009-06-10 00:09:20
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boouy

银虫 (正式写手)
筛选一下你的DH5a有没有抗行。
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23楼2009-06-10 07:49:49
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zhangda28

铜虫 (初入文坛)
还有可能与感受态细胞有关！
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24楼2009-06-10 09:19:21
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xudan667

木虫 (正式写手)
是抗性平板培养时间长而长出的假阳性菌株!

转化时预表达时间可以加长
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25楼2009-06-10 10:59:58
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)
可能性分析：
1. 平板上长出来的是假阳性，可能原因平板上amp失活。可能导致该结果a.倒板时温度太高b.平板放置太久c.amp分布不均匀d. amp配置浓度过低。
2. 试管中amp浓度太高，菌生长受阻
3. 实验室有噬菌体污染导致细菌长不起来
建议：所有实验用品全部新配后再次实验。
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26楼2009-06-10 11:07:58
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humants

金虫 (正式写手)
注意做抗生素对照，很多原因会导致Amp在固体培养基中失活，如
1，加抗生素时培养基太热，抗生素失活。
2。加抗生素时候培养基太冷了，抗生素没混匀，出现假阳性。
反正是实验中加个对照会解决很多问题，不要图省事。。。祝你好运
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27楼2009-06-10 19:15:04
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