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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大肠杆菌转化中碰到的问题，请指教！
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by DLLB at 2009-6-3 10:39:
不知道你的amp+ LB平板中你的amp是倒平板之前加进去的还是后来涂平板的，如果是倒之前加的有可能温度太高使amp失效了，涂平板的话又可能涂不均匀，因此建议抗生素浓度价高一点，操作时注意细节

倒平板之前加的，感觉培养基不太烫的时候加抗生素的，温度不会超过50摄氏度，可能抗生素浓度低了点，请问你一般用多高浓度的Amp？
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低调务实！
11楼2009-06-03 10:44:04
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
Amp浓度我用40-60ug/ml。
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Thank-you，so-blue.
12楼2009-06-03 12:52:17
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DLLB

金虫 (小有名气)
我一般用100-150ug/ml
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13楼2009-06-03 12:58:26
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zhlq_mail

铜虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流！ 6-10 12:02
如果你买的市面上药店里的，我建议使用100-150ug/ml ，你的情况我遇到过，假阳性很高，多加些抗生素对试验影响不太大。你的Lb培养基没问题吧？同时也同意楼上说的你挑菌时没挑进管里。
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14楼2009-06-03 13:42:06
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)
我试验的时候也遇到很多这样的情况，估计是由于平板上的amp浓度不行，筛选不彻底，转到amp液体就不行了。希望对你有帮助。
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15楼2009-06-03 14:23:50
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhlq_mail at 2009-6-3 13:42:
如果你买的市面上药店里的，我建议使用100-150ug/ml ，你的情况我遇到过，假阳性很高，多加些抗生素对试验影响不太大。你的Lb培养基没问题吧？同时也同意楼上说的你挑菌时没挑进管里。

那么请问你最后怎么解决的呢？你做的一般一个平板中有多少个转化子菌落？
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低调务实！
16楼2009-06-03 14:36:01
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ilaveu

木虫 (著名写手)
重新提取质粒试一下?
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17楼2009-06-03 14:42:28
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
不知个位用没用DH5α做，你们的转化子接到LB液体培养基后，一般多长时间能看到培养基变浑浊？12个小时时没看见浑浊，16个小时后有长出来的，不知正常不？
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低调务实！
18楼2009-06-03 14:57:04
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更深的蓝

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 大海一孤舟 at 2009-6-3 14:23:
我试验的时候也遇到很多这样的情况，估计是由于平板上的amp浓度不行，筛选不彻底，转到amp液体就不行了。希望对你有帮助。

谢谢这位仁兄，平板和液体培养基中的amp浓度是一样的，100ug/ml。
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低调务实！
19楼2009-06-09 00:25:51
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jqq1985

银虫 (正式写手)
是卫星菌落把。
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20楼2009-06-09 12:49:00
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