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更深的蓝

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by DLLB at 2009-6-3 10:39:
不知道你的amp+ LB平板中你的amp是倒平板之前加进去的还是后来涂平板的,如果是倒之前加的有可能温度太高使amp失效了,涂平板的话又可能涂不均匀,因此建议抗生素浓度价高一点,操作时注意细节

倒平板之前加的,感觉培养基不太烫的时候加抗生素的,温度不会超过50摄氏度,可能抗生素浓度低了点,请问你一般用多高浓度的Amp?
低调务实!
11楼2009-06-03 10:44:04
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

Amp浓度我用40-60ug/ml。
Thank-you,so-blue.
12楼2009-06-03 12:52:17
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DLLB

金虫 (小有名气)

我一般用100-150ug/ml
13楼2009-06-03 12:58:26
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zhlq_mail

铜虫 (小有名气)


amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-10 12:02
如果你买的市面上药店里的,我建议使用100-150ug/ml ,你的情况我遇到过,假阳性很高,多加些抗生素对试验影响不太大。你的Lb培养基没问题吧?同时也同意楼上说的你挑菌时没挑进管里。
14楼2009-06-03 13:42:06
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大海一孤舟

铜虫 (小有名气)

我试验的时候也遇到很多这样的情况,估计是由于平板上的amp浓度不行,筛选不彻底,转到amp液体就不行了。希望对你有帮助。
15楼2009-06-03 14:23:50
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更深的蓝

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by zhlq_mail at 2009-6-3 13:42:
如果你买的市面上药店里的,我建议使用100-150ug/ml ,你的情况我遇到过,假阳性很高,多加些抗生素对试验影响不太大。你的Lb培养基没问题吧?同时也同意楼上说的你挑菌时没挑进管里。

那么请问你最后怎么解决的呢?你做的一般一个平板中有多少个转化子菌落?
低调务实!
16楼2009-06-03 14:36:01
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ilaveu

木虫 (著名写手)

重新提取质粒试一下?
17楼2009-06-03 14:42:28
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更深的蓝

木虫 (正式写手)

不知个位用没用DH5α做,你们的转化子接到LB液体培养基后,一般多长时间能看到培养基变浑浊?12个小时时没看见浑浊,16个小时后有长出来的,不知正常不?
低调务实!
18楼2009-06-03 14:57:04
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更深的蓝

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 大海一孤舟 at 2009-6-3 14:23:
我试验的时候也遇到很多这样的情况,估计是由于平板上的amp浓度不行,筛选不彻底,转到amp液体就不行了。希望对你有帮助。

谢谢这位仁兄,平板和液体培养基中的amp浓度是一样的,100ug/ml。
低调务实!
19楼2009-06-09 00:25:51
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jqq1985

银虫 (正式写手)

是卫星菌落把。
20楼2009-06-09 12:49:00
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