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求助 染色体步移法扩启动子
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| 本人近两个月在扩启动子，之前有一个基因扩到了700+bp，用的是TAKARA 染色体步移试剂盒，后来继续设计引物，结果第三轮的时候出现了涂抹带，本人尝试提高退火温度，改变模板浓度等依然没有进展，现在不知道该如何进展下一步实验，希望大神看到能指点指点！在此谢过啦 |
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2019-09-03 15:05:24, 4.81 M
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2楼2019-09-15 13:09:04
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takara的试剂盒容易遇到这样的问题，它的优势是简单便宜，一个两个基因适合用，扩增多长就是碰运气了。 十年前用过其他公司试剂盒，质量远远好于takara，90%以上能扩增到4kb以上，但是手续复杂，适合大量基因的上游扩增 发自小木虫Android客户端 |
3楼2019-09-22 09:33:12
抚指依觞
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4楼2019-10-31 12:15:30
5楼2020-03-08 12:49:19
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百度学术里面找吧，具体叫啥名字我记不得了，一篇SCI，好像是接头巢式PCR，一共需要跑三轮，特殊的程序和11个引物（Fsp1-Fsp9，F2，F3），加上自行设计的三个引物。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2020-03-08 17:35:41