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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

[求助] 东西扩不出来,求助啊已有1人参与

有一个问题咨询一下,我想要表达一个鸡的受体蛋白,现在卡在第一步了 。从文献上扒了几对引物,自己也设计了几对,效果都不理想。最后决定将预计大小的条带切胶回收后再扩了一轮,出现一条杂带,分别回收测序,结果都是一个什么细菌的序列。造成这种情况会是什么原因?怎么解决?  谢谢~@biostar2009@youlinglyw
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by rohdy at 2019-08-27 11:02:50
如果知道序列可以直接合成基因

课题组穷啊,木有钱~

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5楼2019-08-27 11:42:27
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rohdy

新虫 (著名写手)

如果知道序列可以直接合成基因

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2楼2019-08-27 11:02:50
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芊默Anna

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

3楼2019-08-27 11:35:17
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 芊默Anna at 2019-08-27 11:35:17
序列多大,序列2K以上确实不太容易提

1000多,不大

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4楼2019-08-27 11:41:50
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel

你的组织块清理不干净,有细菌残留

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奋斗是我们前进的动力!
6楼2019-08-27 11:47:42
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by xn8008 at 2019-08-27 11:47:42
你的组织块清理不干净,有细菌残留

用的就是剖检病料,要除菌难度有点大~

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7楼2019-08-27 12:47:27
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芊默Anna

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

8楼2019-08-27 15:22:56
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 芊默Anna at 2019-08-27 15:22:56
如果引物没有问题,也有可能是酶的问题
...

手上有的mix都用过,效果都不大好

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9楼2019-08-27 17:25:57
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-08-27 22:21:42
你是从提组织RNA开始的吗?真核生物的基因克隆以cDNA为模板,如果得到的cDNA质量好的话,不会出现扩增不出来的情况。
10楼2019-08-27 18:04:26
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