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jzy101jzy

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[求助] 东西扩不出来，求助啊已有1人参与

有一个问题咨询一下，我想要表达一个鸡的受体蛋白，现在卡在第一步了。从文献上扒了几对引物，自己也设计了几对，效果都不理想。最后决定将预计大小的条带切胶回收后再扩了一轮，出现一条杂带，分别回收测序，结果都是一个什么细菌的序列。造成这种情况会是什么原因？怎么解决？谢谢~@biostar2009@youlinglyw

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1楼 2019-08-27 10:56:04

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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by rohdy at 2019-08-27 11:02:50
如果知道序列可以直接合成基因

课题组穷啊，木有钱～

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5楼2019-08-27 11:42:27

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rohdy

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如果知道序列可以直接合成基因

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2楼2019-08-27 11:02:50

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芊默Anna

禁虫 (小有名气)

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3楼2019-08-27 11:35:17

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jzy101jzy

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3楼: Originally posted by 芊默Anna at 2019-08-27 11:35:17
序列多大，序列2K以上确实不太容易提

1000多，不大

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4楼2019-08-27 11:41:50

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xn8008

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你的组织块清理不干净，有细菌残留

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6楼2019-08-27 11:47:42

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jzy101jzy

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6楼: Originally posted by xn8008 at 2019-08-27 11:47:42
你的组织块清理不干净，有细菌残留

用的就是剖检病料，要除菌难度有点大～

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7楼2019-08-27 12:47:27

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芊默Anna

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

8楼2019-08-27 15:22:56

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jzy101jzy

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8楼: Originally posted by 芊默Anna at 2019-08-27 15:22:56
如果引物没有问题，也有可能是酶的问题
...

手上有的mix都用过，效果都不大好

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9楼2019-08-27 17:25:57

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xinxiyuzhou

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-08-27 22:21:42

你是从提组织RNA开始的吗？真核生物的基因克隆以cDNA为模板，如果得到的cDNA质量好的话，不会出现扩增不出来的情况。

10楼2019-08-27 18:04:26

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