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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 东西扩不出来，求助啊
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

[求助] 东西扩不出来，求助啊 已有1人参与

有一个问题咨询一下，我想要表达一个鸡的受体蛋白，现在卡在第一步了 。从文献上扒了几对引物，自己也设计了几对，效果都不理想。最后决定将预计大小的条带切胶回收后再扩了一轮，出现一条杂带，分别回收测序，结果都是一个什么细菌的序列。造成这种情况会是什么原因？怎么解决？  谢谢~@biostar2009@youlinglyw
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1楼 2019-08-27 10:56:04
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by rohdy at 2019-08-27 11:02:50
如果知道序列可以直接合成基因

课题组穷啊，木有钱～

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5楼2019-08-27 11:42:27
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普通回帖

rohdy

新虫 (著名写手)
如果知道序列可以直接合成基因

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2楼2019-08-27 11:02:50
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芊默Anna

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
3楼2019-08-27 11:35:17
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 芊默Anna at 2019-08-27 11:35:17
序列多大，序列2K以上确实不太容易提

1000多，不大

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4楼2019-08-27 11:41:50
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xn8008

至尊木虫 (知名作家)

Balance Angel
你的组织块清理不干净，有细菌残留

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奋斗是我们前进的动力！
6楼2019-08-27 11:47:42
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xn8008 at 2019-08-27 11:47:42
你的组织块清理不干净，有细菌残留

用的就是剖检病料，要除菌难度有点大～

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7楼2019-08-27 12:47:27
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芊默Anna

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
8楼2019-08-27 15:22:56
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 芊默Anna at 2019-08-27 15:22:56
如果引物没有问题，也有可能是酶的问题
...

手上有的mix都用过，效果都不大好

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9楼2019-08-27 17:25:57
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-08-27 22:21:42
你是从提组织RNA开始的吗？真核生物的基因克隆以cDNA为模板，如果得到的cDNA质量好的话，不会出现扩增不出来的情况。
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10楼2019-08-27 18:04:26
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