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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 菌株诱变完后需做哪些实验
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zhongzsj

金虫 (著名写手)

快乐家族---幽幽

[交流] 菌株诱变完后需做哪些实验

对菌株做诱变后筛选出酶活高的菌株了，接着要做哪些工作呢，有些资料说做原生质体融合，提质粒等实验，不太明白整个流程，我主要工作是得到酶活高的菌株，而且能够稳定传代下来，急需高手和有做过诱变的师兄师姐们提供宝贵建议，建议完整而且比较好的我会多给金币的

[ Last edited by zhongzsj on 2009-7-10 at 08:30 ]
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不矢口亻十么日寸候亻奄口斤言兑言仑土云有辶寸氵虑敏感字节白勺言兑氵去于是亻奄学会了扌斥字后来亻奄米青礻申分歹刂了。
1楼 2009-05-31 13:16:09
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wfjbioon

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
zhongzsj(金币+1,VIP+0):谢谢，先感谢一下！ 5-31 22:32
zhongzsj(金币+1,VIP+0):有详细点就更好了 6-3 12:41
zhongzsj(金币+1,VIP+0):没有其他的建议，就这样慢慢撒金币吧 6-4 13:14
后面就是做反复传代，考察菌种的稳定性。
可以挑选关键酶基因，进行PCR比较分析，弄清活力高的原因。
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看着你怎么觉得这么眼熟啊？
2楼2009-05-31 14:54:40
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liyanll83

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
zhongzsj(金币+1,VIP+0):谢谢！先感谢一下！ 5-31 22:33
zhongzsj(金币+1,VIP+0):有详细点就更好了 6-3 12:41
zhongzsj(金币+1,VIP+0):没有其他的建议，就这样慢慢撒金币吧 6-4 13:15
1、如果酶活没有达到要求，可以继续诱变（最好换种诱变方法，同种方法运用多次会引起回复突变、负突变）或用基因的方式提高酶活；
2、如果酶活已经达到要求，要对菌种的稳定性进行验证，以确保高酶活的特性能稳定遗传。
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米虫一条！
3楼2009-05-31 17:16:43
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wfjbioon

铁杆木虫 (正式写手)
继续往下做的话可以挑你知道的和这个酶的合成过程有关的关键酶基因进行northern分析，了解转录和表达的调控。扩大些的话，可以做基因差示分析，说不定可以发现新的调控机制和合成途径什么的。
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看着你怎么觉得这么眼熟啊？
4楼2009-06-04 14:53:13
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040312027

银虫 (小有名气)
可以通过基因操作的方法进一步提高
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5楼2009-06-04 16:27:01
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bbyu007

木虫 (正式写手)
最近貌似关于调控的研究有新的趋势，就是：什么东西都和“网络”联系起来就发好文章。。。。汗。。。。自己的一点见解，可以无视哈
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我是笨笨鱼~~~
6楼2009-06-04 16:32:17
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zhongzsj

金虫 (著名写手)

快乐家族---幽幽
郁闷，都没有高手来指导一下，结果上周五作报告被痛骂一顿，其中“提质粒”也被痛骂很惨~~骂归骂，我还是不知道该如何继续做下去~~难道是做一步算一步不成~~
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不矢口亻十么日寸候亻奄口斤言兑言仑土云有辶寸氵虑敏感字节白勺言兑氵去于是亻奄学会了扌斥字后来亻奄米青礻申分歹刂了。
7楼2009-07-09 21:27:26
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your2007

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
amisking(金币+0,VIP+0):欢迎发帖交流！ 7-9 23:03
amisking(金币+2,VIP+0): 7-9 23:03
zhongzsj(金币+2,VIP+0):不知道是不是有段时间没上小木虫，我也放弃了这个贴，恩，我的菌是上届筛选的，发酵优化已经做了，所以想用诱变提高酶活，期待你再次回帖交流 9-3 12:12
楼主做的菌如果是自己筛选的，选取优良菌株做菌株鉴定，如果是实验室保存的，就可以通过各种途径提高酶活，不管是那种情况，发酵优化是必须的，手段很多，诱变，正交，响应面等等以及后续是否有必要对酶纯化，自己根据实验目的而定，推荐个发酵人论坛看看，你或多或少可以学到下一步会做什么了，而不会这么迷茫了，祝好运！
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爱人者被爱，敬人者人敬
8楼2009-07-09 23:02:39
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主
★
zhongzsj(金币+1,VIP+0):谢谢！ 9-3 12:13
帮顶！
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如果没有人帮助你，那么你就去帮助别人。
9楼2009-07-09 23:04:06
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zhongzsj

金虫 (著名写手)

快乐家族---幽幽
期待有人继续回答
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不矢口亻十么日寸候亻奄口斤言兑言仑土云有辶寸氵虑敏感字节白勺言兑氵去于是亻奄学会了扌斥字后来亻奄米青礻申分歹刂了。
10楼2009-09-04 15:16:01
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