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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 载体连接转化DH5a，长菌落PCR跑不出条带
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玫瑰蔷薇月季

新虫 (初入文坛)
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载体连接转化DH5a，长菌落PCR跑不出条带
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诚恳求教: 连接的载体转化大肠杆菌后能长菌，长得不多不少，跟平时连T载体的斑点差不多，但是跑PCR检测什么条带都没有，到底是哪里有问题，求高手指点！！！谢谢！

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1楼 2019-08-10 22:31:47
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宇智波斑5547

新虫 (著名写手)
★
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首先考虑假阳性。比如平板上长出的是空载体，你用目的基因的引物去pPCR，结果检测不到。

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4楼2019-08-10 22:33:49
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木元雨

木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个，再重新做一次，顺便把对照做好，就基本上可以找到原因了

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8楼2019-08-10 23:09:31
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jinghonglxt

金虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 木元雨 at 2019-08-10 23:09:31
这个，再重新做一次，顺便把对照做好，就基本上可以找到原因了

对照？怎么讲

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9楼2019-08-11 06:14:22
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lovejinghui

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
只能多挑些菌落，你挑的可能都是空的

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10楼2019-08-11 09:05:30
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mql_csu

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by jinghonglxt at 2019-08-11 06:14:22
对照？怎么讲
...

阴性对照：用来说明你所用的材料本身（不发生连接反应）不会让板子上长菌；
阳性对照：用来说明你的菌只要用完整的质粒转化，就能长出来克隆。
具体怎么做你看着办吧，做对照实在是很基础很基础但又很重要的东西了。。。。。
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11楼2019-08-12 00:42:50
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宇智波斑55472楼
2019-08-10 22:32   回复  
玫瑰蔷薇月季(金币+1): 谢谢参与
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hdchina20103楼
2019-08-10 22:32   回复  
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jinghonglxt5楼
2019-08-10 22:33   回复  
玫瑰蔷薇月季(金币+1): 谢谢参与
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tzynew6楼
2019-08-10 22:34   回复  
玫瑰蔷薇月季(金币+1): 谢谢参与
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dzxylxm7楼
2019-08-10 22:35   回复  
玫瑰蔷薇月季(金币+1): 谢谢参与
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