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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 请问过凝胶柱的方法
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liu33feng

[交流] 请问过凝胶柱的方法

大家好
我一个植物的正丁醇部分过硅胶柱（150-200目，柱长50cm，内径3.5cm）。流动相用氯仿:甲醇:水梯度洗脱（50：1：0.1     25:1:0.1     ------）.  在流动相10：1：0.1   和5：1：0.1下来的组分具有活性。然后点板，层析液为：氯仿：甲醇1：1.   有6个点。

现在想用Sephadex LH一20进一步纯化，不过其分子量不很清楚，不知这样可以吗。另外这个极性应该是中等吧。

呵呵 对这个原理不是很懂，跟着步骤走，初学，希望大家指点下。
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1楼 2009-05-30 17:12:29
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zinedine

新虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 5-30 21:18
可以用凝胶试一试，甲醇好溶的话就用甲醇洗脱吧
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2楼2009-05-30 20:36:15
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liu33feng

用分析纯 甲醇洗脱 应该可以哦
那我看试试
谢谢哦
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3楼2009-05-30 21:39:55
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gyp1271985

木虫 (著名写手)
量大的话也可以用硅胶等度洗脱。然后刮板，这样快些
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4楼2009-05-31 11:13:00
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hejiangbo

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
凝胶柱 材料sephdex LH-20, 一般装甲醇柱或者氯甲柱（1：1），当然极性更加大的话可以用甲醇水柱，根据极性上柱。凝胶材料比较昂贵，所以上样前保证尽量少的杂质或者固体不容物，必须先过滤，保重材料实用寿命！ 上什么样的柱子就用什么样的溶剂溶解过滤为最好！
凝胶柱为分子筛原理，分子量大的先下来！
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兜兜转转半生已过
5楼2009-05-31 18:28:21
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独步青云

新虫 (职业作家)

术中小生
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 5-31 23:50
凝胶柱常用的洗脱系统有两种：一是甲醇-水系统（最常用的是纯甲醇），不过偶用过50%的甲醇洗脱极性稍大的化合物，分离效果还不错，我同学还用过纯水直接冲分皂苷，听说效果也很好，不过得是短些的，长的都不流了。这种系统下分离原理就是分子筛和反相结合的；
另外一种就是氯仿：甲醇系统（常用1：1开始），这种是以分子筛为分离原理的。
像你的这个样品，我建议用70%左右的甲醇-水系统来冲下试试看。
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6楼2009-05-31 23:31:02
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