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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 老师，您好。请问为什么hplc，同样的样品同样的条件跑出来会...
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LXY1121

新虫 (初入文坛)

[求助] 老师，您好。请问为什么hplc，同样的样品同样的条件跑出来会...

老师，您好。请问为什么hplc，同样的样品同样的条件跑出来会不一样，前面一次挺正常的，后面的图峰都挤在前面一起出了。
流动相是乙腈和0.1％磷酸水。进样中间都有90％乙腈充柱10min,平衡15min。请问这是怎么回事呢？ @klicking

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1楼 2019-08-06 16:34:18
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xhw520lzz

金虫 (正式写手)
为什么要用90％乙腈+10%  0.1％磷酸水冲柱10min呢？如果没平衡好，也会出现这个情况，
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2楼2019-08-06 17:04:54
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jiazi45

木虫 (小有名气)

质谱小白
液相的干扰因素挺多的，排查起来大致次序是：
1，重复进样，看问题能否重现；
2，重新制样，包括试剂变更、器皿变更、人员变更等等，看问题能否重现；
3，变更色谱条件，包括流速、比例、流动相、色谱柱、仪器等，看问题能否重现。
做过几次排查，就明白问题更可能是出现在什么地方了。
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质谱检测工具-小程序-分子量计算器
3楼2019-08-06 17:59:13
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shane牛

新虫 (初入文坛)
小伙子，看了你的两张图。方法有没有编错。一张图70分钟，一张图85分钟（手机看有点糊，好像是这样的。）你把你冲柱子编到方法里去了？

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4楼2019-08-06 21:39:50
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LXY1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xhw520lzz at 2019-08-06 17:04:54
为什么要用90％乙腈+10%  0.1％磷酸水冲柱10min呢？如果没平衡好，也会出现这个情况，

那用100的乙腈冲吗？

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5楼2019-08-08 09:27:29
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LXY1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by shane牛 at 2019-08-06 21:39:50
小伙子，看了你的两张图。方法有没有编错。一张图70分钟，一张图85分钟（手机看有点糊，好像是这样的。）你把你冲柱子编到方法里去了？

方法是一样的，可能一张图放大得更大吧。充柱条件应该可以设置在方法里吧？

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6楼2019-08-08 09:31:59
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shane牛

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by LXY1121 at 2019-08-08 09:31:59
方法是一样的，可能一张图放大得更大吧。充柱条件应该可以设置在方法里吧？
...

工作站不一样，方法设置不一样。所以我不是很清楚你的机器是什么样的。像你这样全部都提前出峰，一种原因就是你的B相(乙腈)比例变大了。你可以对比两次图谱的压力是不是差不多的。如果有明显差别的话，可以考虑我说的原因。

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7楼2019-08-09 16:48:42
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LXY1121

新虫 (初入文坛)
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7楼: Originally posted by shane牛 at 2019-08-09 16:48:42
工作站不一样，方法设置不一样。所以我不是很清楚你的机器是什么样的。像你这样全部都提前出峰，一种原因就是你的B相(乙腈)比例变大了。你可以对比两次图谱的压力是不是差不多的。如果有明显差别的话，可以考虑我说 ...

好的谢谢！

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8楼2019-08-12 19:27:30
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