| 查看: 701 | 回复: 6 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
wuqicheng123木虫 (正式写手)
|
[交流]
HPLC分离度与重现性
|
||
|
在做一个样品HPLC条件的优化时,遇到个问题向大家请教下 用的HPLC-ELSD-UV.上次做的时候,其中各个成分分离度良好 今天作的时候,分离度就不行了,原来分开的三个峰现在都堆叠在一起了.仪器和仪器方法都没有变,同一个梯度洗脱,样品也是同一个样品,柱子也是同一个柱子 为什么就重现不出来了呢?可能有哪些原因呢?有知道的高手解释下,小弟在这谢过了!! |
回复此楼» 猜你喜欢
急需调剂
已经有8人回复
-
申博/考博
已经有4人回复
-
化工学硕294分，求导师收留
已经有37人回复
-
求调剂
已经有11人回复
-
260求调剂
已经有4人回复
-
一志愿华中农业071010，320求调剂
已经有19人回复
-
304求调剂
已经有7人回复
-
求博导｜生物质基多孔碳/超级电容方向，已有相关成果，寻能源材料/碳材料方向老师
已经有3人回复
-
二苯甲酮酸类衍生物
已经有6人回复
-
接受任何调剂
已经有4人回复
EdwardLau
木虫 (著名写手)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 11645.3
- 散金: 5196
- 红花: 14
- 帖子: 1357
- 在线: 196.9小时
- 虫号: 429885
- 注册: 2007-08-05
- 性别: GG
- 专业: 化学工程
6楼2009-05-29 20:26:52
naren4545
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 贵宾: 0.05
- 金币: 2307.9
- 红花: 1
- 帖子: 703
- 在线: 64.3小时
- 虫号: 438965
- 注册: 2007-10-04
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
2楼2009-05-29 14:50:35
五四青年772
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 605.4
- 帖子: 451
- 在线: 26.7小时
- 虫号: 502052
- 注册: 2008-02-14
- 性别: GG
- 专业: 中药学其他科学问题
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wuqicheng123(金币+8,VIP+0):好详细阿 在这学习了 5-29 16:00
wuqicheng123(金币+8,VIP+0):好详细阿 在这学习了 5-29 16:00
|
样品进入色谱柱后，在柱子以外的任何死体积（进样器、柱接头、连接管、检测器）中，样品分子的扩散和滞留，都会引起色谱峰的展宽，而使柱效降低 。 使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml／min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8ml／min为佳。当选用最佳流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量) 柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，柱外死体积要小 如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。这种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取净）再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相（与柱内相同）填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善，但是很难恢复到新柱的水平。 还有一种可能是柱温的问题.温度不稳定会影响溶剂（甲醇，乙腈）的溶解度。通常温度低组分保留时间增长，对于大都数性质稳定的组分来说，冬天与夏天分析同一样品，温度的影响会改变出峰的时间，峰形稍有所变，另分离度可能会受一些影响，但影响程度不至于不能重复分离条件.  |
4楼2009-05-29 15:56:05
北斗星星
至尊木虫 (知名作家)
老版主
- 应助: 4 (幼儿园)
- 贵宾: 2.275
- 金币: 16812.5
- 散金: 1197
- 红花: 37
- 沙发: 1
- 帖子: 8001
- 在线: 738.6小时
- 虫号: 539325
- 注册: 2008-04-04
- 性别: GG
- 专业: 药物资源
5楼2009-05-29 16:06:55
20