24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 3005  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 大肠杆菌pet28a载体上限制性内切酶位点的选择已有1人参与

虫友们好,我想利用大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主,利用pET28a作为载体表达一段1400多个碱基的酶蛋白基因序列。已知目的基因上有EcoRI和SphI 两个限制性酶切位点,不知道应该怎样选择限制性酶切位点才能启动强表达该目的蛋白。谢谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (职业作家)


3楼2019-07-21 22:21:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
bio-boy: 金币+10, ★★★很有帮助 2019-07-22 10:08:44
bio-boy: 金币+20, ★★★很有帮助 2019-07-24 19:28:01
bio-boy: 金币+20, ★★★很有帮助 2019-07-27 12:30:26
能不能强启动表达一般和启动子有关,如果不改变启动子的话你要做的是不要造成移码突变。

发自小木虫Android客户端
2楼2019-07-21 22:06:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 渊博震天 at 2019-07-21 22:06:01
能不能强启动表达一般和启动子有关,如果不改变启动子的话你要做的是不要造成移码突变。

请问我现在有重组质粒的序列,怎么知道质粒载体的类型和目的基因的类型,已经在NCBI上Blast了,比对不出来。
4楼2019-07-24 19:33:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio-boy

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by biosci at 2019-07-21 22:21:42
选ndei和hindiii就很好

请问我现在有重组质粒的序列,怎么知道质粒载体的类型和目的基因的类型,已经在NCBI上Blast了,比对不出来。
5楼2019-07-24 19:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见