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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr遇到的问题
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饕餮娘子花

新虫 (初入文坛)

[交流] pcr遇到的问题 已有2人参与

引物到了以后跑了一次梯度pcr，得到了适合的温度及程序，然后我就胶回收继续做了，没到十天左右我重新pcr就p不出来了，药品使用的是天根Mix，使用的水是去离子水又高压灭菌之后的，之前就有这种问题，现在又出现了，哪位大神可以解惑，我实在受不了了，毕业实验还没啥结果，就一直卡在这，明年要毕业了，怕延迟毕业啊，求帮助

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1楼 2019-07-18 20:12:54
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如慕?

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-19 22:31:04
如果没有引物二聚体，可能是引物降解 如果条带弥散或p不出来，可能是模板降解，总之考虑下引物和模板的问题

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3楼2019-07-19 15:45:15
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雪色残洋

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们实验用的DEPC水

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2楼2019-07-19 08:43:41
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饕餮娘子花

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 如慕? at 2019-07-19 15:45:15
如果没有引物二聚体，可能是引物降解 如果条带弥散或p不出来，可能是模板降解，总之考虑下引物和模板的问题

只有引物二聚体。
用相同的模板，药品，酶，和水去p另一条基因就有条带。p不出来的条带之前能p出来的时候有胶回收，胶回收pcr也有目的条带。这让我很难受，不知道问题出在哪了

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4楼2019-07-20 07:07:54
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