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小镇记忆

新虫 (初入文坛)

[求助] 同源克隆 已有1人参与

利用同源保守区设计引物,PCR得到的产物总是大于预测的X 基因长度,一直得不到目的条带,所以猜测X 基因在不同的物种中的基因序列长度是否存在差异?所以是否要将大于目的条带的基因片段测序?请个各位大佬解疑。

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mql_csu

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我没做过,但是从字面上理解,1.是否考虑过内含子;2.如果pcr条带单一,杂带不明显,可以考虑测序(从预测序列中间找引物往两边测,测不出来也许并不花钱)。基因组p东西,我的经验是凭运气,非特异性问题还有发卡结构什么的实在很难琢磨,不对就赶紧重新设计引物。
2楼2019-07-13 15:10:26
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