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新虫 (初入文坛)

[求助] 同源克隆已有1人参与

利用同源保守区设计引物，PCR得到的产物总是大于预测的X 基因长度，一直得不到目的条带，所以猜测X 基因在不同的物种中的基因序列长度是否存在差异？所以是否要将大于目的条带的基因片段测序？请个各位大佬解疑。

发自小木虫Android客户端

1楼 2019-07-10 16:58:20

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铁虫 (小有名气)

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我没做过，但是从字面上理解，1.是否考虑过内含子；2.如果pcr条带单一，杂带不明显，可以考虑测序（从预测序列中间找引物往两边测，测不出来也许并不花钱）。基因组p东西，我的经验是凭运气，非特异性问题还有发卡结构什么的实在很难琢磨，不对就赶紧重新设计引物。

2楼2019-07-13 15:10:26

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