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najyklsh

新虫 (小有名气)

[求助] LPS刺激小胶质BV2细胞

大家好,我刚接触细胞,现在用正在做LPS诱导BV2的炎症模型,我所用的LPS浓度是100ng/ml和1ug/ml,可是这两个检测出来的mtt与对照组几乎没有差别,一氧化氮检测也没有差别,我自己分析了一下原因,也麻烦大家给个意见。着急毕业请大家帮帮忙,谢谢各位了。

1.铺板后我的BV2细胞几乎都是园的,再结合着数据,我猜想是不是,铺完板未加LPS的细胞就已经是激活状态了,那如果是这样,我该怎么办,怎么让他恢复静息状态

2.LPS配制问题。我用PBS溶解LPS,配制成100ug/ml,之后再用无血清但含有1%双抗的dmem/f12 1:1培基稀释成100ng/ml和1ug/ml。我见有的说不加双抗,有的说浓度小时不能用pu管装

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2楼2019-07-08 15:05:13
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najyklsh

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by helloox13 at 2019-07-08 15:05:13
先找到自身的原因,比如细胞、试剂、方法等。若还不是希望的,可能是文献错了,或者方法不一样

方法应该没有问题,因为好多文献都用LPS刺激小胶质BV2,这个是典型的炎症细胞模型。细胞应该也没有问题,因为培养瓶中的状态是静息状态的细胞,LPS我用这个刺激过神经母瘤可以刺激出来ROS

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3楼2019-07-08 19:22:19
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lyliuxia

新虫 (小有名气)

你好 你现在诱导出来了吗
4楼2020-09-29 08:24:32
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