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木虫 (小有名气)

[交流] DTT与蛋白液混合后变黄

请教大家：我的蛋白是溶于Tris缓冲液中，pH8.5，溶液中只有Tris，蛋白浓度为4mg/ml，分别加入三分之一体积的20mM和4mM的DTT（即DTT终浓度分别为5mM和1mM），可是加入后，溶液都变成淡黄色了，透明不浑浊，请问这是为什么呢？是我的蛋白变性了吗？DTT贮存液都是无色透明的。

1楼 2009-05-26 14:05:27

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金虫 (正式写手)

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fkbp23(金币+1,VIP+0):谢谢！ 5-27 00:47

没见过，我拿去煮也没变黄过

2楼2009-05-26 17:25:02

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银虫 (正式写手)

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fkbp23(金币+9,VIP+0):谢谢，很有帮助，不过我的蛋白是过柱纯化过的，是不是DTT放置太久被氧化了呢？ 5-27 00:49

我也遇到过，应该是DTT变性的缘故，最好先透析然后再加DTT就好了。

3楼2009-05-26 19:20:44

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银虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

我当时是过完镍柱后，对着含DTT的缓冲透析的发现有黄褐色的沉淀，后来就不在透析液中加DTT，而是充分透析后再加就没有这种现象了。我怀疑是镍柱上的Ni++漏下来了。

4楼2009-05-27 12:26:48

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