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biogefart

木虫 (著名写手)

[交流] 如何提高DNA片段的转化率?

我做的感受态用质粒转化还行,一旦遇到连接片段或者长的DNA片段就很难转化,大家有知道怎么提高的吗?

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:18 ]
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闹太套
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haoyou3003

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得可以加大模板浓度,使用电转会好很多
3楼2009-05-26 13:48:36
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yuweibest

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这是菌体的特性!排斥外源基因片段!我也正在做重组菌以及表达这方面,确实小片段容易些,大片段以及需要和受体基因组整合的片段确实很难转化!我也正在摸索提高的方法!个人觉得提高质粒的量会不会好一点!或者干脆用电转算了!
2楼2009-05-26 12:56:56
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

n你说的是细菌还是真菌啊
4楼2009-05-26 16:58:08
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
现在很多公司都有制作感受态细胞的溶液出售,TaKaRa,NEB都有,我试过比自己实验室配置做出来的感受态细胞的转化效率高很多。相同的连接产物,自己做出来的可能只有10个克隆,买的溶液做出来就满满一板
5楼2009-05-26 17:41:55
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