应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何提高DNA片段的转化率？
81/1返回列表
查看: 899  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

biogefart

木虫 (著名写手)

[交流] 如何提高DNA片段的转化率？

我做的感受态用质粒转化还行，一旦遇到连接片段或者长的DNA片段就很难转化，大家有知道怎么提高的吗？

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:18 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
闹太套
1楼 2009-05-26 12:18:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuweibest

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这是菌体的特性！排斥外源基因片段！我也正在做重组菌以及表达这方面，确实小片段容易些，大片段以及需要和受体基因组整合的片段确实很难转化！我也正在摸索提高的方法！个人觉得提高质粒的量会不会好一点！或者干脆用电转算了！
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-05-26 12:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haoyou3003

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我觉得可以加大模板浓度，使用电转会好很多
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-05-26 13:48:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)
n你说的是细菌还是真菌啊
赞一下 回复此楼
4楼2009-05-26 16:58:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charlies929

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
现在很多公司都有制作感受态细胞的溶液出售，TaKaRa，NEB都有，我试过比自己实验室配置做出来的感受态细胞的转化效率高很多。相同的连接产物，自己做出来的可能只有10个克隆，买的溶液做出来就满满一板
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-05-26 17:41:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rest_cjt

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by haoyou3003 at 2009-5-26 13:48:
我觉得可以加大模板浓度，使用电转会好很多

片段大的话，电转试试吧
赞一下 回复此楼
6楼2009-06-04 01:21:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2008207380

金虫 (小有名气)
片段如果偏大的话，试试电击转化应该会好点吧
赞一下 回复此楼
7楼2009-06-04 10:10:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
另外大肠杆菌的株系也有不同的摄取DNA的能力，DH10B一般用来建BAC库的，可以摄取更大片段的DNA，而DH5－alpha的摄取能力就差远了。如果片段比较大的话可以考虑用DH10B，感受态自己作的就可以，这个感受态买的时候太贵了。电转感受态做法和其他株系差不多，菌浓度到0.76－0.8左右会比菌浓0.4的转化率要高一些。祝好运。
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
8楼2009-06-04 10:52:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 biogefart 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭