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Limax-Tang新虫 (正式写手)
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[求助]
同源重组(无缝克隆)做不出来，求解决/改进方案。 已有2人参与
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在上海华东理工的实验室做同源重组效果很好，基本都比较容易的能挑出阳性克隆;但同样的实验在杭州浙江工业大学的实验室做却结果很差，不知道有没有经历过类似情况的同志提出宝贵的建议！万分感激！希望大家能多多交流~ 另外重组酶是上海翊圣的。 发自小木虫Android客户端 |
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GRUBBY_WU
铁杆木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
Limax-Tang: 金币+10, ★★★很有帮助 2019-07-15 08:47:33
感谢参与，应助指数 +1
Limax-Tang: 金币+10, ★★★很有帮助 2019-07-15 08:47:33
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同样的经历对于搞科研都应该遇见不少，不过楼主之前已有成功经验，实验流程上应该没有大的问题，可能要细细撸一遍实验流程才能找到问题，我之前也经常做同源重组，SLIC，Gibson组装都试过，公司的kit也用过不少，遇见不成功的最可能的问题就是扩的不好或者同源臂有问题，仔细检查下没有问题的话，可以考虑先买公司的kit做，安利genscript的genbuilder还可以，毕竟实验不等人，原因可以慢慢找。祝好。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2019-07-04 12:46:27
wshdhr8
铁虫 (小有名气)
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3楼2019-07-04 13:03:06
prthefu
木虫 (著名写手)
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4楼2019-08-06 15:51:15
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我们实验室之前用的也是圣羽的，用着用着就做不出来了，后来换了诺唯赞的就好了，我构建到了9200bp片段+5000的pcdna3.1，但是现在最近一个月，我用诺唯赞死活做不出来。。。。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2019-08-14 22:42:27
30